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青島捷世康生物科技有限公司

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閱讀：1474發(fā)布時(shí)間：2016-9-7

土壤β-葡萄糖苷酶（Solid-β-Glucosidase，S-β-GC）試劑盒說(shuō)明書(shū)

分光光度法 50 管/24 樣

測(cè)定意義：

S-β-GC 能夠催化水解芳基或烴基與糖基原子團(tuán)之間的糖苷鍵生成葡萄糖，是纖維素分解酶系中重要組成成分之一，在土壤微生物的糖類(lèi)代謝方面具有重要生理功能。

測(cè)定原理：

S-β-GC 能夠催化對(duì)-硝基苯-β-D 吡喃葡萄糖苷生成對(duì)-硝基*，后者在 400nm 有特征光吸收。

自備用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰、甲苯和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：甲苯 5mL×1 瓶，4℃保存；（自備）

試劑二：粉劑×2 瓶，-20℃保存；臨用前每瓶加入 10mL 蒸餾水，充分溶解備用，用不完的試劑仍-20℃保存；試劑三：液體 25mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：液體 50mL×1 瓶，4℃保存；

測(cè)定步驟：

混勻， 37℃水浴 1h 后，立即沸水浴煮沸 5min（蓋緊，防止水分散失），流水冷卻

充分混勻，室溫靜置 2min 后，400nm 處蒸餾水調(diào)零，測(cè)定吸光值 A，計(jì)算ΔA=A 測(cè)定管-A對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。

S-β-GC 活力計(jì)算：

標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為 y = 0.0032x -0.0027；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μmol/L），y 為吸光值。單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1 μmol 對(duì)-硝基*定義為一個(gè)酶活力單位。

S-β-GC 活力（U /g 土樣）＝ (ΔA+0.0027) ÷0.0032×V 反總÷W÷T =138.7×(ΔA+0.0027) T：反應(yīng)時(shí)間，1h=1/24d； V 反總：反應(yīng)體系總體積：9.25×10^-4 L；W：樣本質(zhì)量，0.05g。