每孔中先各加入樣品稀釋液100 ul,*孔再加標(biāo)準(zhǔn)品100 ul,混勻后用移液器吸出100 ul,移至第二孔,如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋至第7孔,zui后,ELISA試劑盒從第7孔中吸出100 ul棄去,使之體積均為100 ul。第8孔為空白對(duì)照。
1、以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待查樣品均建議做復(fù)孔,每次測(cè)定均要做標(biāo)準(zhǔn)孔。
2、本試劑盒宜置-20 ℃冷藏保存。
3、本小鼠ELISA試劑盒取出的試劑在室溫（20~25 ℃）環(huán)境下使用,溶液應(yīng)輕輕搖勻后使用。
4、本試劑盒含2M硫酸,不要將它與含*的廢物混在一起。
5、板條開封后剩余板條要再封好,ELISA試劑盒保持板條干燥。
6、避免交叉污染。如洗滌時(shí)向樣品待測(cè)蛋白含量可能高的一側(cè)傾倒。
7、提前24 h打開烤箱預(yù)熱。
8、底物工作液應(yīng)在顯色前5~10 min配制。若配制時(shí)間過(guò)長(zhǎng),會(huì)變質(zhì)。
9、甩盡孔內(nèi)液體,每孔加350 ul左右洗滌液,靜止30 s后甩盡。尤其加抗體工作液或底物時(shí)盡量弄干孔內(nèi)液體。ELISA試劑盒且孵育過(guò)程中要蓋住各反應(yīng)孔,防止液體恢復(fù)。
10、盡量防止樣品待測(cè)蛋白濃度過(guò)高而出現(xiàn)酶標(biāo)儀顯示out。當(dāng)酶標(biāo)儀測(cè)定值出現(xiàn)許多out時(shí),可通過(guò)稀釋一定倍數(shù)后用可見光分光計(jì)測(cè)定,所有孔均同時(shí)測(cè)定。