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液相色譜儀之液相色譜法測定醬油中的7種有機酸

閱讀:1407發(fā)布時間:2017-5-22

 

醬油是我國的傳統(tǒng)發(fā)酵調味品,由于其*的風味、色澤以及豐富的營養(yǎng)價值,已成為我國、日韓、東南亞各國乃至歐美人民飲食生活中*的調味品。醬油中含有多種有機酸,zui主要的是乳酸,其次是焦*,此外還會有較少量的琥珀酸、檸檬酸、醋酸、蘋果酸等,多種有機酸在酸味及風味方面對醬油的風味起到了一定的綜合作用,但是焦*是沒有鮮味的,對醬油風味是不起作用的。醬油生產過程中蛋白質原料經蛋白酶作用產生*,再由*酶分解成*,但是當醬油曲料中缺乏*酶或其酶活力偏低時,*便會經非酶解的渠道生成焦*。與此同時,當*濃度較低時,*轉化成焦*的反應也會比較激烈。

一般醬油中的有機酸含量多以總酸為代表,但多種有機酸在不同條件下解離出氫離子的程度不同,各種有機酸的解離度也不同,所以總酸作為測酸指標并不能恰如其分地反映酸的程度。

目前國內對于醬油中有機酸的研究比較多,所采用的分析方法主要有氣相色譜法(GC)、液相色譜法(HPLC)、離子色譜法(IC)等,但是關于醬油中焦*含量的檢測報道較少。

實驗采用固相萃取-液相色譜法測定醬油中焦*等7種有機酸的含量,該方法能有效解決醬油蛋白質和色素含量高導致干擾有機酸分析以及造成色譜柱污染等問題,分析速度快,靈敏度高,結果準確。

 

實驗儀器設備:

LC600B型液相色譜儀

LC-600B智能全控液相色譜系統(tǒng)由1臺P600B高壓恒流泵、1臺UV600B紫外檢測器與1臺SCL600B系統(tǒng)控制器直接構成梯度分析系統(tǒng)。*采用柱塞浮動式安裝方式,增強儀器性能的穩(wěn)定性和使用的持久性。

廣泛應用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗、食品檢測、化工分析、監(jiān)測等眾多分析領域。

固相萃取小柱

全自動電位滴定儀

 

樣品前處理 :

稱取醬油樣品10.0 g于100 mL燒杯中,加入約40 mL水,用10%氫氧化鈉調節(jié)pH值至8.2,轉入100 mL容量瓶中,定容至刻度。將固相萃?。⊿PE)小柱以此用3 mL甲醇活化,3 mL水平衡,備用。吸取0.50 mL上述醬油溶液轉移至固相萃取柱中以自然流速過柱,待樣品全部吸附后用3 mL水淋洗,流速約3 mL/min,抽至近干后,用2.00 mL鹽酸(1+20)以不超過1 mL/min流速洗脫。洗脫液過0.22 μm微孔濾膜后,供HPLC分析。

 

色譜條件:

色譜柱

Agilent SB-Aq(150 mm×4.6 mm×5 μm)

流動相

0.01 mol/L磷酸氫二銨,用磷酸調至pH=2.7

流速

0.7 mL/min

柱溫

35 ℃

波長

210 nm

進樣量

20 μL

 

色譜圖:

 

                有機酸混合標準色譜圖

 


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