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技術(shù)文章

液相色譜儀測(cè)定尿中甲酸和乙酸

閱讀:2782發(fā)布時(shí)間:2017-6-15

甲醛,乙醛廣泛存在于環(huán)境中,它們主要來(lái)源包括機(jī)動(dòng)車(chē)尾氣、烹調(diào)油煙、香煙煙霧、建筑、裝飾材料,并對(duì)身體有不良影響,能引起對(duì)鼻咽部、皮膚和眼睛的直接刺激,損害呼吸系統(tǒng)等;還具有致癌性、生殖毒性等??諝庵屑兹┖鸵胰┙?jīng)呼吸道吸收后,在體內(nèi)經(jīng)生物轉(zhuǎn)化,zui終以甲酸和乙酸的形式從尿液中排出。尿中甲酸和乙酸可以作為職業(yè)性接觸甲醛和乙醛的生物標(biāo)志物,其含量可以反映甲醛和乙醛的體內(nèi)劑量。實(shí)驗(yàn)用1-溴甲基-五氟基苯和甲酸、乙酸衍生成相應(yīng)的酯,以液相色譜法分離,對(duì)甲酸和乙酸進(jìn)行有效的分離、測(cè)定。

 

原理

甲酸鹽和乙酸鹽在堿性條件下可與1-溴甲基-五氟基苯反應(yīng),生成性質(zhì)穩(wěn)定的酯,經(jīng)液相色譜柱分離,檢測(cè)器在225nm處檢測(cè)。

 

儀器設(shè)備

LC-600B液相色譜儀配自動(dòng)進(jìn)樣器

 

LC-600B智能全控液相色譜系統(tǒng)由1臺(tái)P600B高壓恒流泵、1臺(tái)UV600B紫外檢測(cè)器與1臺(tái)SCL600B系統(tǒng)控制器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。*采用柱塞浮動(dòng)式安裝方式,增強(qiáng)儀器性能的穩(wěn)定性和使用的持久性。廣泛應(yīng)用于研究開(kāi)發(fā)、醫(yī)藥檢驗(yàn)、食品檢測(cè)、化工分析、監(jiān)測(cè)等眾多分析領(lǐng)域。

 

實(shí)驗(yàn)步驟

尿樣的采集 :用聚乙烯塑料瓶,采集甲醛、乙醛接觸工人晨尿或班后尿,4℃冰箱貯存,二周內(nèi)分析。

尿樣預(yù)處理與測(cè)定: 取0.2ml磷酸鹽緩沖溶液(pH7.6)和0.2ml尿液加入10ml試管中,再向其中加入20μg/μl 1-溴甲基-五氟基苯溶液1.0ml,旋渦震蕩1min,于60℃水浴保溫1h。用正己烷2.0ml萃取,3000r/min離心5min,取上層有機(jī)相,針頭式過(guò)濾器過(guò)濾(濾膜孔徑0.45μm),濾液放入自動(dòng)進(jìn)樣器小瓶,待分析用。

 

色譜工作條件

色譜柱

Agilent C18250mm×4.6mm×5μm

流動(dòng)相

甲醇/水(65/35)

溫度

室溫

進(jìn)樣體積

30μl

流速

1.0ml/min

檢測(cè)波長(zhǎng)

225nm

 

色譜圖

 

                  甲酸、乙酸分離色譜圖


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