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技術(shù)文章

高效液相色譜法測定*及其代謝產(chǎn)物*

閱讀:678發(fā)布時間:2020-4-21

  細胞色素P450I A2(CYPI A2)是主要存在于肝臟起氧化代謝作用的藥物代謝酶,*是研究P450I A2活性的特異性底物。口服或靜脈注射*后,經(jīng)P450I A2酶催化,氮位去乙基,形成*。通過測定兩者濃度,可以反應(yīng)P450I A2在體內(nèi)的活性。文獻報道只測定*單一組分。本實驗建立了高效液相色譜法同時測定*及其代謝物*的濃度,方法簡便、快速、結(jié)果準確、可靠,適合藥物的體內(nèi)代謝研究。

儀器準備

 

儀器簡介

    LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時控制數(shù)臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等,實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。

 

應(yīng)用領(lǐng)域

化合物檢測、法醫(yī)毒物分析、蛋白質(zhì)組學(xué)食品檢測、藥物分析、環(huán)境分析、聚合物分析

 

樣品處理:

精取血樣0.2mL,加50μL內(nèi)標,加入100μL2.5%硫酸鋅溶液,振蕩30s,16000r/min離心10/min,取上清液20μL進樣測定。

 

譜條件:

 

色譜柱

Nova-Pak R C18(3.9mm×150mm,5μm)

流動相

甲醇水溶液

梯度洗脫程序

17%(體積分數(shù),下同)甲醇(保持5min)→80%甲醇(10min)→17%甲醇(12min)

流速

1.0mL/min

檢測波長

254nm

進樣量

20ml

 

 

譜圖分析

 

 

 


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