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上海博研生物工程研究中心
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閱讀:547發(fā)布時間:2015-4-9
近些年來,免疫學分析方法發(fā)展很快,特別是在使用標記了的抗原和抗體的分析技術(shù)以后,使原來許多經(jīng)典的分析方法在敏感性和特異性方面都不能相比。ELISA試劑盒有著高特異性、靈敏性等優(yōu)點,接觸ELISA實驗的科研檢測員也越來越多,那么ELISA新手操作實驗之前需要做哪些準備?
①標本制備要規(guī)范,每份標本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實驗者,注意低溫保存。
②備好所有實驗額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機等。
③根據(jù)檢測標本數(shù)量確定所需試劑的量。
④按說明書將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑。
⑤ 選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對;若選擇兩個單抗,必須識別不同表位的抗體;從同一家公司選擇抗體對。
⑥ ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)實驗中進行彼此相抗的滴定。同時,應(yīng)包括在適當范圍內(nèi)的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作。
⑦一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml??衫脴藴实腅LISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
⑧若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng),應(yīng)嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉,疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
⑨標準品的配制:對于每種細胞因子應(yīng)仔細閱讀說明書,注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前,瞬時離心試劑瓶,盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批說明書中的細節(jié),將凍干的細胞因子復(fù)溶。
博研生物ELISA試劑盒服務(wù)標準:
1.有質(zhì)量問題免費包換,合同上注明了的.(質(zhì)量問題包括運輸不當,客戶在使用過程中測不出結(jié)果,等等?。?/span>
2.全程技術(shù)指導。(包括售前的標本收集,使用過程中不明白的地方,實驗結(jié)束后的數(shù)據(jù)分析,有任何疑問,我們技術(shù)都會即時給你去電)
3.提供免費代測的服務(wù)。(你只需把標本寄過來,我們?yōu)槟愎?jié)省時間,幫你出結(jié)果,原始數(shù)據(jù),分析數(shù)據(jù)均可提供,一般時間是5天左右)
4.客戶有任何問題,我們都是在一個工作日之內(nèi)給出解決方案。售后和技術(shù)這一塊都是竭誠為客戶服務(wù)。
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