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髓鞘染色液的操作步驟
髓鞘(myeLin sheath)是包裹在神經(jīng)軸突外面的管狀鞘結(jié)構(gòu),呈節(jié)段性,具有絕緣作用并提高神經(jīng)沖動的傳導速度,在中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)中起保護軸突作用。髓鞘由鞘磷脂構(gòu)成,其成分主要是類脂質(zhì)和蛋白質(zhì)。髓鞘染色具有一定的病理診斷意義,如果髓鞘發(fā)生病變,在染色時髓鞘數(shù)量顯著減少或消失,或髓鞘形態(tài)不規(guī)則。
本產(chǎn)品髓鞘染液主要成分為:髓鞘染液A為0.1%固藍((LuxoL fast bLue),染液B為分化液,染液C是70%乙醇。經(jīng)本產(chǎn)品染色后,神經(jīng)髓鞘呈藍色,背景淡藍色或近乎無色。
操作步驟
1. 石蠟切片脫蠟至水。
2. 將髓鞘染液A在65℃烘箱提前預熱30 min。組織切片進入預熱的髓鞘染液A中65℃染色4 h(加蓋防止液體蒸發(fā))。
3. 室溫自然冷卻后取出切片,自來水洗至玻片流水呈無色。
4. 切片迅速浸入髓鞘染液B中快速分化5 s,然后取出切片立即置于髓鞘染液C中快速分化10 s,即使切片交替浸入髓鞘染液B和髓鞘染液C中進行分化,及時鏡檢直至髓鞘呈藍色背景近無色,然后水洗終止分化。
5. 切片經(jīng)3次無水乙醇脫水,每次5 min,再經(jīng)二甲苯透明5 min,然后用中性樹膠封片。
注意事項
1. 髓鞘染液A預熱很重要,染液溫度會對組織著色的強弱有一定影響。
2. 切片經(jīng)染液A染色水洗后,需要盡快分化,避免組織干片。
3. 操作時請穿實驗服,并佩戴一次性手套。
髓鞘染色液的操作步驟
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