明膠酶譜檢測(cè)試劑盒

簡(jiǎn)介：

基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)以無(wú)活性的酶原形式分泌，活化后能夠降解細(xì)胞外基質(zhì)的膠原蛋白，又稱膠原酶。通過(guò)影響細(xì)胞外基質(zhì)，膠原酶參與胚胎發(fā)育、形態(tài)發(fā)生、組織重塑等過(guò)程，并參與炎癥、腫瘤、心血管、神經(jīng)等許多疾病過(guò)程。血漿與組織中的MMP-2、MMP-9參與各種生理與病理過(guò)程，其在診斷和治療中的意義日益受到重視。

明膠酶譜法是一種新型的蛋白質(zhì)分析方法，它可以提供準(zhǔn)確的蛋白質(zhì)質(zhì)量分析和分子量分析結(jié)果。明膠酶譜法可以快速有效地測(cè)定蛋白質(zhì)中的氨基酸和糖基化激酶的活性。這種方法通

過(guò)使用蛋白質(zhì)，核酸和其他復(fù)合物構(gòu)成的聚合物，結(jié)合相關(guān)的酶誘發(fā)反應(yīng)，來(lái)分析蛋白質(zhì)的質(zhì)量和分子量。這些復(fù)合物可以在單獨(dú)的氨基酸片段中用來(lái)測(cè)量激酶反應(yīng)，從而識(shí)別活性位點(diǎn)，反映了蛋白質(zhì)質(zhì)量和分子量分析的結(jié)果。

明膠酶譜法的原理是基于膠質(zhì)酶結(jié)合物，它由多種蛋白質(zhì)，核酸和其他復(fù)合物組成，使用酶

誘發(fā)反應(yīng)來(lái)分析蛋白質(zhì)的質(zhì)量和分子量。該方法由激酶和聚合物組成，它們分別催化了激酶和聚合物的反應(yīng)，從而產(chǎn)生了激酶的活性。此外，該方法還能夠測(cè)量氨基酸片段的活性，這將有助于評(píng)估蛋白質(zhì)的質(zhì)量和分子量。

檢測(cè)目的:

本試劑盒用于檢測(cè)MMP-2、MMP-9 酶譜及活性（Detect MMP2 and MMP9 as low as 1nM）

檢測(cè)原理：

本試劑盒采用酶譜法(Zymography)檢測(cè)MMP-2、MMP-9 活性。Zymography 是一種廣為使用的、基于SDS-PAGE 電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測(cè)方法，其靈敏度可達(dá)1 nM，高于ELISA方法，其基本原理1和程序是：制備加有膠原酶底物的SDS-PAGE 凝膠，含蛋白酶的樣品在此凝膠中進(jìn)行電泳，電泳結(jié)束后取出凝膠與酶反應(yīng)Buffer 孵育，凝膠染色與脫色。凝膠中由于含底物蛋白而被深染，形成深色背景，但在有蛋白酶條帶的位置，蛋白酶將降解凝膠中的底物蛋白，因而不被染色而形成透亮區(qū)域，從而能同時(shí)指示MMP-2、MMP-9的大小位置(酶譜)及活性。本試劑盒提供MMP-2、MMP-9 特異蛋白底物及酶學(xué)反應(yīng)緩沖液，可檢測(cè)少至0.1~0.5 μl 血液中的MMP-2、MMP-9 酶譜及活性，檢測(cè)靈敏度~1nM。試劑盒可進(jìn)行50次標(biāo)準(zhǔn)小膠檢測(cè)，如果小膠加樣孔為10~15個(gè)，則總計(jì)可檢測(cè)500~750個(gè)樣品。

試劑盒組成與儲(chǔ)存:

A. 2 x SDS-PAGE non-reducing buffer 1.5 ml, -20℃保存

B.10 x Substrate G, 50 ml,-20℃保存:

C.10 x Buffer A,50 ml,4℃保存,使用時(shí)用蒸餾水稀釋

D.10 x Buffer B,50 ml,4 ℃保存,使用時(shí)用蒸餾水稀釋:

E.SDS-PAGE 凝膠蛋白質(zhì)考馬斯亮藍(lán)染色液,50ml,4℃保存

注意事項(xiàng)

1.10 mM EDTA能夠抑制MMP活性

2.凝膠干燥:可使用聚丙烯-酰胺凝膠干膠裝置室溫快速干燥凝膠，作為記錄保留。

3.本試劑盒僅供科研實(shí)驗(yàn)使用，不得用于食用、臨床醫(yī)療等其它用途。

4.實(shí)驗(yàn)操作中，請(qǐng)穿戴好實(shí)驗(yàn)服、防護(hù)口置和一次性實(shí)驗(yàn)手套，避免直接接觸，嚴(yán)禁入口。

使用該試劑盒發(fā)表的文章:

本產(chǎn)品僅供科研，不得用于臨床，醫(yī)療，食用等

明膠酶譜檢測(cè)試劑盒