ELISA檢測(cè)試劑盒的三種檢測(cè)方法

時(shí)間：2024/10/10閱讀：326

　　1. 雙抗體夾心法（Sandwich ELISA）

　　原理：該方法使用兩個(gè)抗體，一個(gè)作為捕獲抗體固定在微孔板上，另一個(gè)作為檢測(cè)抗體帶有酶標(biāo)記。樣本中的目標(biāo)抗原被捕獲抗體固定后，檢測(cè)抗體與抗原結(jié)合，通過(guò)酶的底物反應(yīng)產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)。

　　操作流程：樣本加入微孔板，與預(yù)包被的捕獲抗體結(jié)合；加入酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體，與已結(jié)合的抗原結(jié)合；加入底物，產(chǎn)生顏色變化，通過(guò)顏色深淺定量分析抗原含量。

　　2. 競(jìng)爭(zhēng)法（Competitive ELISA）

　　原理：競(jìng)爭(zhēng)法中，樣本中的目標(biāo)抗原與已知濃度的抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合有限數(shù)量的抗體。樣本中抗原含量越高，結(jié)合到抗體上的標(biāo)記抗原就越少，產(chǎn)生的信號(hào)也就越弱。

　　操作流程：將樣本和已標(biāo)記的抗原同時(shí)加入含有抗體的微孔板中，讓它們競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體；洗去未結(jié)合的成分后，加入底物，通過(guò)顏色變化來(lái)定量分析樣本中的抗原含量。

　　3. 間接法（Indirect ELISA）

　　原理：間接法首先使用未標(biāo)記的抗體與樣本中的抗原結(jié)合，然后加入酶標(biāo)記的二抗(抗抗體)來(lái)識(shí)別并結(jié)合到一抗上。通過(guò)酶的底物反應(yīng)產(chǎn)生信號(hào)，間接檢測(cè)目標(biāo)抗原。

　　操作流程：樣本加入微孔板，抗原與板上的抗體結(jié)合；加入酶標(biāo)記的二抗，與一抗結(jié)合；加入底物，產(chǎn)生顏色變化，通過(guò)顏色深淺定量分析抗原含量。

　　以上三種方法是ELISA檢測(cè)試劑盒中常見(jiàn)的檢測(cè)技術(shù)，每種方法都有其特定的應(yīng)用場(chǎng)景和優(yōu)勢(shì)。選擇哪種方法取決于檢測(cè)的目的、樣本類(lèi)型以及所需的靈敏度和特異性。



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