放射免疫方法檢測透明質(zhì)酸A的含量-信帆生物

透明質(zhì)酸A在大多數(shù)情況下都是選擇用放射免疫的方法來檢測，包括上也經(jīng)常選擇使用放免的方法來測透明質(zhì)酸A，那么放免的原理具體是什么，檢測靈敏度是多少？上海信帆為您答疑解惑？

透明質(zhì)酸（Hyaluronic Acid, HA）是一種廣泛存在于細胞外基質(zhì)中的高分子多糖，主要由肝內(nèi)皮細胞進行降解。肝組織正常結構受到損傷時，一方面 HA 的合成增加，另一方面肝臟對 HA 的降解能力下降，導致血清中 HA 水平明顯增高，并且增高的程度與肝組織炎癥及纖維化程度呈正相關。

急性肝炎、慢性活動性肝炎、肝硬化以及肝癌都導致血清 HA 水平增高，某些惡性腫瘤、肺心病患者的血清 HA 水平也會增高。慢性肝炎在用干擾素或激素進行治療時，伴有血清 HA 水平下調(diào)。胚胎兒血清 HA *，新生兒血清 HA 仍維持在較高水平，隨著年齡增長血清 HA 逐漸降低，到中、老年又略有升高。

血清 HA 水平是反映肝纖維化的重要指標，也可用于抗纖維化藥物治療時的動態(tài)觀察。

本方法采用競爭放射免疫分析法，即標準或待測樣品中的 HA 和¹²⁵I-HA 共同與*的透明質(zhì)酸結合蛋白（Hyaluronic Acid BindingProtein, HABP）在適宜的條件下進行競爭性結合反應。一部分 ¹²⁵I-HA125與 HABP 結合形成復合物，而另一部分呈游離狀態(tài)。 I-HA 與 HABP

結合的比例取決于標準或待測樣品中非標記 HA 的含量，非標記 HA的含量越高，¹²⁵I-HA 與 HABP 形成的復合物越少。HA-HABP 復合物與 HABP 抗體和第二抗體形成交聯(lián)的聚合物沉淀下來，測定沉淀物的放射性計數(shù)。經(jīng)過適當?shù)臄?shù)據(jù)處理后可獲得標準曲線，從標準曲線

上查出被測樣品的 HA 含量（數(shù)據(jù)可由計算機自動處理）。

【適用儀器】

適用于各類γ-放射免疫分析儀。

【血樣處理】

取靜脈血分離血清，48 小時內(nèi)測量可在 2~8℃密閉保存；超過 48

小時-20℃密閉冷凍保存，至少穩(wěn)定 2 個月，但要避免反復凍融。

【本藥盒的主要技術指標 】

1. 測定范圍：25~800ng/ml；

2. 靈敏度：5.5ng/ml；

3. 精密度：批內(nèi)變異 CV<10%；批間變異 CV<15%。

【注意事項】收到藥盒后盡快存放在 2-8℃保存，使用前應平衡至室

溫，加試劑前必須搖勻。

1. 操作前請仔細閱讀說明書，不同批號的試劑不得混用。

2. 加樣操作應快速準確手法一致，盡量縮短整個加樣時間。一

批測定中管數(shù)不宜過多，以加入 HABP 前后管相差在 5 分鐘

內(nèi)為宜，嚴格控制每步反應的時間和溫度。

3. 加樣頭不可混用，以免交叉污染。

4. 加標準品、質(zhì)控或樣品時注意將樣本加到試管底部；加標記

物時加樣頭不要碰到液面；加抗體時加樣頭應在液面之上約

1cm 以免交叉污染。

5. 溫浴之前應充分混合均勻

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