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信帆生物專業(yè)提供脂肪酶(LPS),產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定,*,確保銷售給客戶的產(chǎn)品是能夠符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),適合客戶要求的產(chǎn)品。本產(chǎn)品*,歡迎新老客戶前來咨詢訂購.
測(cè)定意義:
LPS又稱甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和單酯)。LPS廣泛的存在于各種生物中。血清中LPS的異常增高常見于胰腺炎和胰腺癌。
測(cè)定原理:
LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用銅皂法測(cè)定脂肪酸生成速率,即可計(jì)算LPS活性。
自備儀器和用品:
研缽、臺(tái)式離心機(jī)、震蕩混勻器、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、甲苯、無水乙醇、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體×2瓶,4℃保存。
試劑二:液體×1瓶,室溫保存。
試劑三:液體×1瓶,4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品×1瓶,10 µmol/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液,室溫保存。臨用前加入3.168 mL無水乙醇,充分溶解。
粗酶液提?。?/span>
稱取約0.1g樣品,加試劑一1 mL充分研磨,16000rpm 4℃離心40min,取上清液待測(cè)。
LPS測(cè)定操作:
2. 試劑一和試劑二置于37℃水浴預(yù)熱30min以上。
3. 空白管:取1.5 mL EP管,依次加入150μL試劑一和50μL試劑二,反復(fù)震蕩混勻;加入5μL蒸餾水,迅速震蕩混勻后置于37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)10 min;加入400μL甲苯,反復(fù)震蕩混勻后,室溫4000rpm離心10min;取出離心管,小心吸取上層溶液200μL,加入另一1.5mL EP管,再加入50μL試劑三,反復(fù)震蕩混勻;室溫4000rpm離心10min,小心吸取上層溶液150μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于710nm處測(cè)定吸光值。記為A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取1.5 mL EP管,依次加入150μL試劑一和50μL試劑二,反復(fù)震蕩混勻;加入5μL標(biāo)準(zhǔn)品,迅速震蕩混勻后置于37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)10min;加入400μL甲苯,反復(fù)震蕩混勻后,室溫4000rpm離心10min;取出離心管,小心吸取上層溶液200μL,加入另一1.5mL EP管,再加入50μL試劑三,反復(fù)震蕩混勻;室溫4000rpm離心10min,小心吸取上層溶液150μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于710nm處測(cè)定吸光值。記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 測(cè)定管:取1.5mL EP管,依次加入150μL試劑一和50μL試劑二,反復(fù)震蕩混勻;加入5μL上清液,迅速震蕩混勻后置于37℃水浴準(zhǔn)確反應(yīng)10min;加入400μL甲苯,反復(fù)震蕩混勻后,室溫4000rpm離心10min;取出離心管,小心吸取上層溶液200μL,加入另一1.5mL EP管,再加入50 μL試劑三,反復(fù)震蕩混勻;室溫4000rpm離心10 min,小心吸取上層溶液150 μL,加入微量石英比色皿/96孔板,于710nm處測(cè)定吸光值。記為A測(cè)定管。
注意事項(xiàng):
1、甲苯有毒,實(shí)驗(yàn)過程中需佩戴手套和口罩。
2、實(shí)驗(yàn)過程中須遠(yuǎn)離火源。
信帆生物科技有限公司是一家集生物技術(shù)咨詢、實(shí)驗(yàn)室耗材、科研試劑的銷售、推廣和售后服務(wù)為一體的高科技生物企業(yè),為各大科研機(jī)構(gòu)、高校、技術(shù)生物企業(yè)提供相關(guān)產(chǎn)品。公司憑借良好的產(chǎn)品質(zhì)量和營銷團(tuán)隊(duì)的奮力開拓,市場(chǎng)空間逐步擴(kuò)大,營銷網(wǎng)絡(luò)覆蓋全國,為客戶供應(yīng)服務(wù),、用心的服務(wù)贏得了眾多企業(yè)的信賴和好評(píng),在生物設(shè)備領(lǐng)域迅速崛起。
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