植物原花青素??Oligomeric Proantho Cyanidins, OPC??試劑盒
說(shuō)明書
(分光光度法50T/24S)
測(cè)定意義
原花色素??Oligomeric Proantho Cyanidins，OPC??是一類黃烷醇單體及??聚合體的多酚化合
物，廣泛存在于植物的各種器官中，????*的抗氧化性和清除自由基的作用，廣泛的應(yīng)用
于醫(yī)藥，食品，化妝品，保健品行業(yè)??
測(cè)定原理
在酸性條件??，植物原花青素A 環(huán)??的間苯??酚和間苯??酚??香草醛發(fā)生縮合??應(yīng)，產(chǎn)生
??色化合物，在500nm 處??特征吸收峰，測(cè)定500nm 光吸收值，可??算植物中原花青素的
含????
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天????常溫離心機(jī)??可見(jiàn)分光光度????1 mL 玻璃比色皿??蒸餾水??8%鹽酸和60%乙醇??
試劑組成和配制
提取液??60%乙醇，自備，4℃保存??
試劑一??8%鹽酸20mL，自備，4℃保存??
試劑????粉劑0.2g×1 瓶，4℃避光保存，臨用前?? 20mL ??蒸水溶解??
工作液??臨用前按照用??將試劑一和試劑??按照1:1 混合??
OPC 提取
將樣本烘??至恒重，粉碎，過(guò)40 目篩之后，??取約0.1g，??入2.5mL 提取液，用超聲提取
法進(jìn)行提取，超聲??率300W，破碎5s，間歇8s，提取30min， 12000rpm，25℃，離心10min，
取??清，用提取液定容至2.5mL，待測(cè)??
測(cè)定操作表
對(duì)照管 測(cè)定管
樣本??μL?? 200 200
工作液??μL?? 800
H2O??μL?? 800
混勻，30℃水浴30min， 1mL 玻璃比色皿，對(duì)照管調(diào)零，測(cè)定A500??
OPC ??算公式
標(biāo)準(zhǔn)曲線??y=0.0194x+0.0006，R2=0.999
OPC 含????mg /g??=
0.0194
0.0006 500 A −
×V ??總÷(V 樣÷V 樣總×W)×10-3
= 0.644×(A500-0.0006 ) ÷ W
V 樣總????入提取液體??，2.5mL?? V ??總????應(yīng)總體??，1mL??V 樣????應(yīng)中樣品體??，
0.2mL?? W??樣品質(zhì)??，g
注意??項(xiàng)
1??配制好的試劑??應(yīng)盡快使用，4℃保存時(shí)間??超過(guò)一個(gè)????
2??吸光度變化應(yīng)該控制在0.05~0.8 之間??否則??大樣品??或稀釋樣品，注意??算公式中參
????算的稀釋倍數(shù)要相應(yīng)改變??