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乳酸脫氫酶（LDH）實(shí)驗(yàn)代測(cè)

測(cè)定原理：乳酸脫氫酶( Lactate dehydrogenase LDH)能催化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸與24二硝基苯肼反應(yīng)生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性溶液中呈棕紅色,通過(guò)比色可求出酶活力。

乳酸脫氫酶（LD或LDH）是一種糖酵解酶，主要作用是催化乳酸氧化為丙酸，將氫轉(zhuǎn)移給NAD成為NADH。乳酸脫氫酶廣泛存在于人體各組織中，多見(jiàn)于心肌、骨骼肌和紅細(xì)胞。
 

乳酸脫氫酶（LDH）存在于人體各組織器官中。LDH是機(jī)體能量代謝中的一種重要酶，LDH質(zhì)與量的改變，直接影響到機(jī)體的能量代謝，當(dāng)機(jī)體各組織器官病變時(shí)，其組織器官本身的LDH要發(fā)生改變，并且可引起血液中LDH改變。
LDH增高主要見(jiàn)于急性心肌梗塞、病毒性肝炎、肝硬化、肺梗塞、某些惡性腫瘤、骨骼肌病、有核紅細(xì)胞骨髓內(nèi)破壞（無(wú)效性造血）、白血病尤其是急性淋巴細(xì)胞型白血病、惡性貧血。
在具有尿毒癥的慢性腎病患者，血清LDH一般正常，經(jīng)透析治療后活性上升，可能與血清中LDH的抑制劑尿素、草酸鹽被除去有關(guān)。

產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：全程約40分鐘，可測(cè)50例左右樣本。
2、取樣量微：本法取樣量10ul～50ul即可測(cè)LDH活力
3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效。
4、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.5%。
5、回收試驗(yàn)： X =101%。
6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
7、測(cè)試面廣：血清(漿)、組織、灌流液、培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)液等所需儀器及自備試劑：
① 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀/半自動(dòng)生化分析儀（比色測(cè)定波長(zhǎng)為440nm）
② 恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
③ 漩渦混勻器
④ 微量移液器

樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測(cè)定。
動(dòng)物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測(cè)定。
培養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書(shū)。

操作流程：
1、按步驟加入樣本和基質(zhì)緩沖液、輔酶Ⅰ
2、漩渦混勻，37℃孵育15分鐘
3、加入2，4-二硝基苯肼，漩渦混勻，37℃孵育15分鐘
4、加入NaOH溶液室溫放置3分鐘，440nm波長(zhǎng)，1cm光徑比色

乳酸脫氫酶（LDH）實(shí)驗(yàn)代測(cè)