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琥珀酸脫氫酶（SDH）實(shí)驗(yàn)代測(cè)

測(cè)定原理：琥珀酸脫氫酶(SDH)催化底物反應(yīng),FAD是該反應(yīng)的輔基,FAD被還原成FADH,該反應(yīng)與26mP的還原相俱聯(lián),測(cè)定26D的還原速度可以推第出的活力。

琥珀酸脫氫酶（Succinate dehydrogenase，簡(jiǎn)稱(chēng)SDH），黃素酶類(lèi)，屬于細(xì)胞色素氧化酶，是TCA循環(huán)中一個(gè)整合于膜上的多亞基酶，在真核生物中，結(jié)合于線粒體內(nèi)膜，在原核生物中整合于細(xì)胞膜上，其是連接氧化磷酸化與電子傳遞的樞紐之一，可為真核細(xì)胞線粒體和多種原核細(xì)胞需氧和產(chǎn)能的呼吸鏈提供電子，為線粒體的一種標(biāo)志酶。

琥珀酸脫氫酶,是線粒體內(nèi)膜的結(jié)合酶，屬膜結(jié)合酶，是連接氧化磷酸化與電子傳遞的樞紐之一，可為真核細(xì)胞線粒體和多種原核細(xì)胞需氧和產(chǎn)能的呼吸鏈提供電子，為線粒體的一種標(biāo)志酶。作為參與三羧酸循環(huán)的關(guān)鍵酶，琥珀酸脫氫酶是反映線粒體功能的標(biāo)志酶之一，其活性一般可作為評(píng)價(jià)三羧酸循環(huán)運(yùn)行程度的指標(biāo)，對(duì)于評(píng)價(jià)線粒體功能、研究致奶牛酮缺乏癥病理過(guò)程等到具有重要意義。
琥珀酸脫氫酶（SDH）催化底物反應(yīng)，F(xiàn)AD是該反應(yīng)的輔基，F(xiàn)AD被還原成FADH，該反應(yīng)與2,6- DPIP的還原相偶聯(lián)，測(cè)定2,6-DPIP的還原速度可以推算出SDH的活力。

產(chǎn)品優(yōu)點(diǎn)如下：
1、快速簡(jiǎn)便：速率法操作全程約5分鐘,可做5-10個(gè)樣本
2、取樣量微：取樣50ul～100ul即可測(cè)血清（漿）中的SDH活力，只需5mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SDH、0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SDH。
3、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放3個(gè)月有效。
4、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.4%。
5、回收試驗(yàn)： X =103%。
6、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強(qiáng)。
7、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血清（漿）、組織等、多種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織等
所需儀器及自備試劑：
1、分光光度計(jì)（比色測(cè)定波長(zhǎng)為600nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、漩渦混勻器
4、微量移液器

樣本收集與前處理：
動(dòng)物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測(cè)定。
培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測(cè)定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》以及試劑盒中詳細(xì)說(shuō)明書(shū)。

操作流程：
1、按步驟加入2.6ml混合試劑，加入100l樣本
2、20秒時(shí)600nm測(cè)出OD1
3、1分20秒時(shí)600nm測(cè)出OD2

琥珀酸脫氫酶（SDH）實(shí)驗(yàn)代測(cè)