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卡邁舒化學(xué)技術(shù)(上海)有限公司


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人乙肝兩對半檢測(HBV)ELISA試劑盒

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更新時間:2018-05-28 18:53:45瀏覽次數(shù):7529次

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產(chǎn)品簡介

卡邁舒化學(xué)技術(shù)(上海)有限公司專業(yè)致力于各種屬ELISA試劑盒的研發(fā),并無償提供代檢測服務(wù),是國內(nèi)多家科研機(jī)構(gòu)及高校的ELISA試劑盒專業(yè)供應(yīng)商,人乙肝兩對半檢測(HBV)ELISA試劑盒質(zhì)量保證,*,發(fā)貨及時,運(yùn)輸嚴(yán)格,產(chǎn)品得到諸多單位科研工作者的認(rèn)可與支持,更有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊用心為您的科研之路保駕護(hù)航,做您身邊的科研伴侶!

詳細(xì)介紹

人乙肝兩對半檢測(HBV)ELISA試劑盒操作步驟:                

實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。                

1 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?/SPAN>100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。                

 2、 棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37溫育1小時。                

 3、 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。               

4、 每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37溫育1小時。                

 5、 棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。                

 6、 每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。                

 7、 每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。                

 8、 立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。                

9、 實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。                

人乙肝兩對半檢測(HBV)ELISA試劑盒實驗操作注意事項:                

1 保存:試劑盒中各試劑請按說明書提示合理存放。在儲存及溫育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊或旋緊以防止蒸發(fā)和微生物的污染,否則可能會出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。                

 2 酶標(biāo)板:剛開啟的酶標(biāo)板孔中可能會有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。               

3、 加樣:加樣或加試劑時,*個孔與zui后一個孔的加樣時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)溫育"時間,從而明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。每次的加樣時間控制在10分鐘內(nèi)。*設(shè)置復(fù)孔實驗。

4、 溫育:為防止樣品蒸發(fā),實驗時必須給酶標(biāo)板覆膜;洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,避免酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);嚴(yán)格遵守給定的溫育時間和溫度。                

5、 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在吸水紙上拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水。在讀數(shù)前要注意清除孔底殘留的液體和手指印,以免影響酶標(biāo)儀讀數(shù)。                

6、 試劑配制:Detection AbHRP Conjugate體積較小,運(yùn)輸過程會使液體沾到管壁或瓶蓋,因此使用前請手甩幾下或1000轉(zhuǎn)/分離心1min,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。取用前,請用移液器小心吹打4-5次使溶液混勻。標(biāo)準(zhǔn)品、Detection Ab工作液、HRP Conjugate工作液請依據(jù)所需的量配制使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請精確配制標(biāo)準(zhǔn)品及工作液,盡量不要微量配制(如吸取Detection Ab時,一次不要小于10μl),以避免由于不準(zhǔn)確稀釋而造成濃度誤差;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、Detection Ab工作液、HRP Conjugate工作液。若需要分次使用標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)按照每一次用量分裝,將其放在-20-80貯存。避免反復(fù)凍融。                

7、 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如每隔5分鐘),如梯度已很明顯,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免顏色過深影響酶標(biāo)儀讀數(shù)。               

8、 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強(qiáng)光直接照射。                

9、  混勻:充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無微     量振蕩器,可在反應(yīng)前手工輕輕敲擊酶標(biāo)板框混勻。                

10 安全:試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)      本時,請按國家生物試驗室安全防護(hù)條例執(zhí)行。                

11、 不同批號的試劑盒組份不能混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)               

12、 試驗中所用的EP管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁混用,否則將影響試驗結(jié)果!                

人乙肝兩對半檢測(HBV)ELISA試劑盒結(jié)果判斷:                

1. 每個標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本的OD值減去空白孔的OD值后作圖,如設(shè)置復(fù)孔,則應(yīng)取其平均值計算。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。                

2. *使用專業(yè)的曲線制作軟件,如curve expert 1.3,在軟件界面既可根據(jù)樣品OD值,由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度,乘以稀釋倍數(shù);亦可用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式,然后將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。                

3. 若標(biāo)本OD值高于標(biāo)準(zhǔn)曲線上限,應(yīng)適當(dāng)稀釋后重測,計算濃度時應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。

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兔抗山羊IgG (H+L)  (山羊IgG 親和純化)/Rabbit Anti-Goat IgG    1mg/10mg/100mg
兔抗豬IgG(H+L)  (豬IgG親和純化)/Rabbit Anti-Pig IgG      1mg/10mg/100mg
兔抗猴IgG(H+L) (猴IgG 親和純化)/Rabbit Anti-Monkey IgG   1mg/10mg/100mg
兔抗人IgG (H+L)  (人IgG 親和純化)/Rabbit Anti-Human IgG   1mg/10mg/100mg
兔抗牛IgG(H+L) ( 牛IgG 親和純化)/Rabbit Anti-Bovine IgG    1mg/10mg/100mg
兔抗雞IgY( 雞IgY親和純化)/Rabbit Anti- Chicken IgY  1mg/10mg/100mg
兔抗人IgG(FC)( 人IgG(FC)親和純化)/Rabbit Anti-Human IgG(FC)1mg/10mg/100mg
山羊抗人Ig ( 人Ig共有部分親和純化)/Goat Anti-Human  Ig    1mg


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