卡邁舒化學(xué)技術(shù)(上海)有限公司專業(yè)致力于各種屬ELISA試劑盒的研發(fā),并無償提供代檢測服務(wù),是國內(nèi)多家科研機(jī)構(gòu)及高校的ELISA試劑盒專業(yè)供應(yīng)商,人腮腺炎病毒(IgG)ELISA試劑盒有專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)為您的實(shí)驗(yàn)提供全程指導(dǎo)及售后跟蹤,價(jià)格實(shí)在,發(fā)貨及時(shí),用心為您的科研之路保駕護(hù)航~
人腮腺炎病毒(IgG)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
人腮腺炎病毒(IgG)ELISA試劑盒結(jié)果判定:
試驗(yàn)有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
臨界值(CUT OFF)計(jì)算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為陰性
判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為陽性
人腮腺炎病毒(IgG)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1.操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,本試劑不同批號組分不得混用。
2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
5.底物請避光保存。
6.試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),使用雙波長檢測時(shí),參考波長為630nm
7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時(shí)必須注意安全。
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