一、細(xì)胞因子(cytokine)是由細(xì)胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物質(zhì)的統(tǒng)稱(chēng)。在免疫應(yīng)答過(guò)程中，細(xì)胞因子在免疫調(diào)節(jié)、炎癥應(yīng)答、腫瘤轉(zhuǎn)移等生理和病理過(guò)程中起重要作用。細(xì)胞因子的檢測(cè)不僅是基礎(chǔ)免疫研究的有較手段，同時(shí)在臨床疾病診斷、病程觀察、療效判斷及細(xì)胞因子治療監(jiān)測(cè)方面具有重要價(jià)值。
但是，由于細(xì)胞因子在體內(nèi)的含量甚微，給細(xì)胞因子的檢測(cè)帶來(lái)困維，細(xì)胞因子的檢4．細(xì)胞病變抑制法病毒可造成靶細(xì)胞的損傷，干擾素等則可抑制病毒所導(dǎo)致的細(xì)胞病變，因此可利用細(xì)胞病變抑制法檢測(cè)這類(lèi)因子。

二、免疫學(xué)檢測(cè)法
細(xì)胞因子均為蛋白或多肽，具有較強(qiáng)的抗原性。隨著重組細(xì)胞因子的出現(xiàn)，可較方便地獲得細(xì)胞因子的特異性抗血清或單克隆抗體，因此可利用抗原抗體特異性反應(yīng)的特性，用免疫學(xué)技術(shù)定量檢測(cè)細(xì)胞因子。盡管細(xì)胞因子種類(lèi)繁多，只要獲得了針對(duì)某一因子的特異性抗體(包括多克隆抗體或單克隆抗體)均可采用相似的技術(shù)開(kāi)展工作。常用的方法包括ELISA、RIA及免疫印跡法。目前，幾乎所有常見(jiàn)細(xì)胞因子的檢測(cè)試劑盒均有商品供應(yīng)。此外還可利用酶標(biāo)或熒光標(biāo)記的抗細(xì)胞因子單克隆抗體，原位檢測(cè)因子在細(xì)胞內(nèi)的合成及分布情況，如近來(lái)來(lái)發(fā)展起來(lái)的細(xì)胞內(nèi)染色法和酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)(ELISPOT)技術(shù)等。免疫學(xué)檢測(cè)法可直接測(cè)定樣品中特定細(xì)胞因子的含量(用ng/ml表示)，為大規(guī)模檢測(cè)臨床病人血清中細(xì)胞因子的含量提供了方便。本法僅測(cè)定細(xì)胞因子的抗原性，與該因子活性不一定相平行，因此要了解細(xì)胞因子的生物學(xué)效應(yīng)，必須結(jié)合生物學(xué)檢測(cè)法。

三、分子生物學(xué)方法
這是一類(lèi)利用細(xì)胞因子的基因探針檢測(cè)特定細(xì)胞因子基因表達(dá)的技術(shù)。目前所有*的細(xì)胞因子的基因均已克隆化，故能較容易地得到某一細(xì)胞因子的cDNA探針或根據(jù)已知的核苷酸序列人工合成寡聚核苷酸探針。利用基因探針檢測(cè)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)的方法多種多樣，常使用斑點(diǎn)雜交、Northern blot、逆轉(zhuǎn)錄PCR，細(xì)胞或組織原位雜交等。實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵在于制備高質(zhì)量的核酸探針和獲得合格的待測(cè)物(提取的mRNA樣品或細(xì)胞/組織標(biāo)本)。核酸探針是指一段用放射性同位素或其他標(biāo)記物(如*等)標(biāo)記并與目的基因互補(bǔ)的DNA片段或單鏈DNA、RNA。根據(jù)其來(lái)源可分為cDNA探針、寡核核苷酸探針、基因組基因探針及DNA探針等。其中cDNA探針和人工合成寡核苷酸探針常用于斑點(diǎn)雜交及Northern blot，而RNA探針因穿透性好更適用于原位雜交。核酸探針技術(shù)的應(yīng)用已經(jīng)程序化，以cDNA探針為例主要包括：①質(zhì)粒DNA的提??；②靶DNA片段的分離；③靶DNA片段標(biāo)記；④待測(cè)樣品mrna的提?。虎輼?biāo)記cDNA探針對(duì)待檢樣品的雜交；⑥放射自顯影或顯色分析。近年來(lái)出現(xiàn)的RT-PCR檢測(cè)特異性mRNA的方法也廣泛用于細(xì)胞因子研究領(lǐng)域。該法具有靈敏、快速等優(yōu)點(diǎn)，甚至從1～10個(gè)細(xì)胞中就可檢出其中的特異mRNA。