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人組織淋巴細(xì)胞分離液說明書

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全過程樣本、試劑及實驗環(huán)境均需在20±2℃的條件下進行。為獲得的實驗結(jié)果,在取樣 2h內(nèi)進行實驗,樣品存放時間越長,細(xì)胞分離效果越差。樣品放置超過6h后分離效果更差甚至不能達到分離目的。本實驗不要使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品,應(yīng)使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品,因為靜電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁、堿處理的玻璃表面會變成毛面,影響細(xì)胞分離效果。.吸取過多的淋巴細(xì)胞層及分離液層會導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒細(xì)胞數(shù)量增加。分離液用量大于組織單細(xì)胞懸液樣本時,分離效果更佳。.如實驗后細(xì)胞得率或活性過低,請上海研謹(jǐn)生物以獲得和幫助。

人組織淋巴細(xì)胞分離液說明書【儲存條件及有效期】
18-25℃保存,有效期 2年。本品易感染細(xì)菌,需無菌條件操作。無菌條件下操作,啟
封后置常溫保存。如 4℃保存,本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。
【參考值(參考范圍)】
本實驗淋巴細(xì)胞提取率及純度大于 80%。
下表為成年人外周血中各種細(xì)胞的數(shù)量及比例,用戶可適當(dāng)進行參考。
人組織淋巴細(xì)胞分離液說明書【相關(guān)實驗技術(shù)方案】

1.組織單細(xì)胞懸液制備技術(shù)。
2.所獲得淋巴細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)。
3.所獲得淋巴細(xì)胞的核酸提取技術(shù)。
4.所獲得淋巴細(xì)胞的鑒定方法
A.流式細(xì)胞技術(shù)
B.免疫組化技術(shù)
C.原位雜交技術(shù)
D.PCR技術(shù)
注:上述技術(shù)方案詳情請登陸上海研謹(jǐn)生物科技公司搜索“細(xì)胞分離、
純化、擴增、鑒定及生物治療技術(shù)手冊”,并在說明書項目欄下下載使用。
人組織淋巴細(xì)胞分離液說明書【可能存在的問題及解決方法】
1.由于血液粘度、細(xì)胞密度等差異可能造成的問題及解決方案如下表所示:

2.本分離液分離細(xì)胞的原理為密度梯度離心,其密度與溫度、大氣壓等密切相關(guān)。不同地
區(qū)客戶可根據(jù)當(dāng)?shù)厍闆r對離心條件進行適當(dāng)調(diào)整。建議對離心條件進行調(diào)整時,恒定離
心時間,對離心轉(zhuǎn)速進行調(diào)整。
3.本分離液依照標(biāo)準(zhǔn),全部使用藥用級原料,性能指標(biāo)與國產(chǎn)同類產(chǎn)品略有不同,可
能出現(xiàn)紅細(xì)胞沉降不*的情況,可以適當(dāng)加大離心轉(zhuǎn)速。
注:在對離心條件進行調(diào)整時,離心轉(zhuǎn)速的加減以 50-100g為基數(shù),直至達到分離效果,
離心力zui小不得小于 400g,zui大不得大于 1200g。離心時間以 20-30min為準(zhǔn)。

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