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當(dāng)前位置:上海一研生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>體視學(xué)的優(yōu)勢(shì)
20世紀(jì)80年代以來(lái),丹麥科學(xué)家Gundersen建立的現(xiàn)代無(wú)偏體視學(xué)方法為微觀形態(tài)結(jié)構(gòu)準(zhǔn)確定量研究提供了可靠方法。當(dāng)我們談到現(xiàn)代體視學(xué)方法時(shí),需感謝Gundersen教授對(duì)體視學(xué)的貢獻(xiàn)。因?yàn)楫?dāng)今在上廣泛應(yīng)用的現(xiàn)代體視學(xué)方法絕大部分是由以Gundersen教授為代表的丹麥科學(xué)家發(fā)明。體視學(xué)方法是一系列用于準(zhǔn)確獲得組織細(xì)胞和亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)三維形態(tài)定量特征的方法。在上,體視學(xué)方法被廣泛應(yīng)用于生物 學(xué)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)。特別值得強(qiáng)調(diào)的是,新的體視學(xué)方法已與各類組織細(xì)胞的特殊染色、免疫組織化學(xué)及分子生物學(xué)圖像(如原位分子雜交圖像)等結(jié)合起來(lái),用于對(duì)經(jīng)過(guò)基因改造(轉(zhuǎn)基因或基因剔除)的動(dòng)物模型的定量研究中。因此,體視學(xué)方法已成為連接形態(tài)學(xué)、功能學(xué)和分子生物學(xué)研究的橋梁。
在實(shí)際應(yīng)用水平上,體視學(xué)方法是一種基于二維切片觀察而獲得顯微結(jié)構(gòu)三維定量信息的有效手段。在統(tǒng)計(jì)概率的意義上講,二維切片包含有三維結(jié)構(gòu)的定量信息。但是,如果要使二維切片獲得的信息真實(shí)地反映三維信息,在器官、切片、視野及空間方向上的抽樣都必須滿足一些基本原則。在運(yùn)用當(dāng)中這些抽樣原則很容易實(shí)現(xiàn)。但同樣也很容易失誤。因此,基于以上所述.我們首先需明確二維切片與三維結(jié)構(gòu)的關(guān)系以及如何有效獲得二維信息,并在此基礎(chǔ)上討論獲得體積、表面積、長(zhǎng)度和數(shù)量等三維定量信息的方法。細(xì)胞
體視學(xué)的優(yōu)勢(shì)在于它以三維定量數(shù)據(jù)來(lái)表達(dá)特征結(jié)構(gòu)信息,先撇開(kāi)體視學(xué)在統(tǒng)計(jì)學(xué)基礎(chǔ)上確立的抽樣原則不談,我們所用來(lái)觀察的二維切片首先應(yīng)該是包含有特征物的。而不論通過(guò)什么窗口(如光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡和激光掃描共聚焦顯微鏡等)來(lái)獲取二維切片圖像,包含特征物的器官組織均稱為參照空間,我們便是在一定參照空間內(nèi)研究特征物的三維定量信息。例如要研究大鼠大腦皮質(zhì)神經(jīng)元,那么。大鼠大腦皮質(zhì)則是參照空間。在進(jìn)行體視學(xué)研究時(shí),對(duì)于參照空間有明確要求,首先,參照空間中包含著特征物;其次,參照空間的邊界清晰可辨;再次,參照空間易于獲取。
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