免疫納米金染色與免疫膠體金―銀法染色基本相似，也可分為包埋前染色和包埋后染色。下面分別介紹包埋前免疫納米金單重染色和與免疫酶染色結(jié)合的雙重染色基本程序：

包埋前免疫，納米金單重染色按以下步驟進(jìn)行免疫染色：

1. 含1％正常血清或1%BSA的PBS預(yù)孵育20～30分鐘；ELISA試劑盒

2. 特異性*抗體4℃孵育24～48小時(shí)后PBS漂洗3次，每次10分鐘；

3. 納米金標(biāo)記IgGFab，片段(1：100，Nanoprobes)室溫孵育2小時(shí)或4℃孵育12小時(shí)后PBS漂洗3次，每次10分鐘，PB漂洗2次，每次10分鐘；

4. PB配制的1％戊二醛固定30分鐘～2小時(shí)，隨后PB漂洗2次，每次10分鐘；

5. 4℃下銀加強(qiáng)漂洗緩沖液漂洗2次，每次10分鐘；

6. 4℃下銀加強(qiáng)10―15分鐘(避光)；

7. 4℃下定影液中定影10分鐘后PB漂洗2次，每次10分鐘；

8. PB配制1%鋨酸后固定30―60分鐘；PB漂洗2次，每次10分鐘。ELISA試劑盒

9. 按常規(guī)電鏡標(biāo)本制作方法進(jìn)行系列乙醇或丙酮脫水、包埋、超薄切片、電子染色和電鏡觀察。

環(huán)氧樹脂包埋前免疫納米金染色示亨廷頓蛋白相關(guān)蛋白(huntingtin-associated protein 1.HAP1)在小鼠腦內(nèi)神經(jīng)元軸突終末內(nèi)突觸囊淮上的定位(A1―A3，含HAP1的軸突終末：A4,無HAP1的軸突終末；D1和D2，樹突。箭示納米金一銀顆粒)ELISA試劑盒