標(biāo)準(zhǔn)血紅蛋白參考液檢測(cè)原理

在溶血液中,血紅蛋白(硫化血紅蛋白除外)中亞鐵離子(Fe2+)被高鐵氰-化鉀氧化成高鐵離子(Fe3+),血紅蛋白轉(zhuǎn)化成高鐵血紅蛋白。高鐵血紅蛋白同氰-化鉀中的氰離子反應(yīng)生成氰化高鐵血紅蛋白。氰化高鐵血紅蛋白在波長(zhǎng)540mm左右有一個(gè)較寬的吸收峰,它在540nm處的吸光度同它在溶液中的濃度成正比。標(biāo)本中血紅蛋白的濃度可通過(guò)先測(cè)得吸光度,然后從標(biāo)準(zhǔn)曲線上按吸光度讀取。也可以同時(shí)與一標(biāo)準(zhǔn)溶液比色而得出結(jié)果。

[產(chǎn)品性能指標(biāo)]

1.標(biāo)準(zhǔn)液測(cè)定準(zhǔn)確性：測(cè)定值與定值差≤２％；

2.純度：光譜掃描圖形。從吸收曲線的形狀判斷，最高吸收峰在540nm，低吸收峰在504nm；

3.吸光度（Ａ值）：其Ａ540／Ａ504在1.590～1.630之間；Ａ750≤0.002；

4.批內(nèi)不精密度：批內(nèi)不精密度的變異系數(shù)CV瓶間≤0.28％

5.批間不精密度：批間不精密度的變異系數(shù)CV瓶間≤0.5％；

6.有效期末的準(zhǔn)確度：取在有效期末的標(biāo)準(zhǔn)液的留樣進(jìn)行檢測(cè)，其溶液中血紅蛋白含量與標(biāo)示值之差≤5% 。

組成結(jié)構(gòu)人體內(nèi)的血紅蛋白由四個(gè)亞基構(gòu)成，分別為兩個(gè)α亞基和兩個(gè)β亞基，在與人體環(huán)境相似的電解質(zhì)溶液中血紅蛋白的四個(gè)亞基可以自動(dòng)組裝成α2β2的形態(tài)。血紅蛋白的每個(gè)亞基由一條肽鏈和一個(gè)血紅素分子構(gòu)成，肽鏈在生理?xiàng)l件下會(huì)盤繞折疊成球形，把血紅素分子抱在里面，這條肽鏈盤繞成的球形結(jié)構(gòu)又被稱為珠蛋白。血紅素分子是一個(gè)具有卟啉結(jié)構(gòu)的小分子，在卟啉分子中心，由卟啉中四個(gè)吡咯環(huán)上的氮原子與一個(gè)亞鐵離子配位結(jié)合，珠蛋白肽鏈中第8位的一個(gè)組-氨酸殘基中的吲哚側(cè)鏈上的氮原子從卟啉分子平面的上方與亞鐵離子配位結(jié)合，當(dāng)血紅蛋白不與氧結(jié)合的時(shí)候，有一個(gè)水分子從卟啉環(huán)下方與亞鐵離子配位結(jié)合，而當(dāng)血紅蛋白載氧的時(shí)候，就由氧分子頂替水的位置。血紅蛋白是脊椎動(dòng)物紅血細(xì)胞的一種含鐵的復(fù)合變構(gòu)蛋白，由血紅素和珠蛋白結(jié)合而成。其功能是運(yùn)輸氧和二氧化碳，維持血液酸堿平衡。也存在于某些低等動(dòng)物和豆科植物根瘤中。分子量約67 000，含有四條多肽鏈，每個(gè)多肽鏈含有一個(gè)血紅素基團(tuán)，血紅素中鐵為二價(jià)，與氧結(jié)合時(shí)，其化學(xué)價(jià)不變，形成氧合血紅蛋白。呈鮮紅色，與氧解離后帶有淡藍(lán)色。