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中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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產(chǎn)品更新-人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

時(shí)間:2023/5/5閱讀:346
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產(chǎn)品更新-人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞


培養(yǎng)基 DMEM-H完-全培養(yǎng)基:90%DMEM-H+10%FBS 


傳代方法 復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速?zèng)]入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL完-全培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,用1-2mL完-全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL完-全培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。


細(xì)胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰-酶(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀(guān)察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(可用吸管吸起些許胰-酶輕輕吹打細(xì)胞層某處,肉眼可見(jiàn)細(xì)胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰-酶,加入5-6mL完-全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐?全培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。;④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),重復(fù)傳代操作或者凍存。

 

生長(zhǎng)條件 培養(yǎng)溫度37℃;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣; 

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng) 

存儲(chǔ)條件 液氮 

類(lèi)型 貼壁生長(zhǎng) 

安全等級(jí) 1 

形態(tài) 上皮細(xì)胞樣,多角形 


細(xì)胞質(zhì)里含有一個(gè)近似球形的細(xì)胞核(Nucleus),是由更加黏稠的物質(zhì)構(gòu)成的。細(xì)胞核通常位于細(xì)胞的中央,成熟的植物細(xì)胞的細(xì)胞核,往往被中央液泡推擠到細(xì)胞的邊緣。細(xì)胞核中有一種物質(zhì),易被洋紅、蘇木精、甲基綠、龍膽紫溶液等堿性染料染成深色,叫做染色質(zhì)(Chromatin)。生物體用于傳種接代的物質(zhì)即遺傳物質(zhì),就在染色質(zhì)上。當(dāng)細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂時(shí),染色質(zhì)在分裂間期螺旋纏繞成染色體。

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