Swe重組胰酶細(xì)胞消化液使用方法產(chǎn)品描述

胰蛋白酶（Trypsin）簡(jiǎn)稱(chēng)胰酶，是一種絲氨酸水解酶，能把多肽鏈中賴(lài)氨酸和精氨酸中的羧基端切斷。在組織細(xì)胞的提取、培養(yǎng)，以及體外細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，均會(huì)使用到胰蛋白酶消化液，用于水解細(xì)胞間蛋白質(zhì)，使組織或細(xì)胞離散成單個(gè)細(xì)胞。傳統(tǒng)胰蛋白酶取自豬、牛等動(dòng)物胰臟。傳統(tǒng)胰酶的來(lái)源和生產(chǎn)工藝特性，決定了其不可避免的會(huì)含有動(dòng)物源雜質(zhì)以及潛在病毒污染。本產(chǎn)品使用重組豬胰蛋白酶替代傳統(tǒng)胰蛋白酶。在生產(chǎn)制備過(guò)程中不使用任何動(dòng)物源性原料，且通過(guò)多輪純化，確保重組豬胰蛋白酶純度以及活率。使其不僅可以替代傳統(tǒng)胰酶的功能，而且可用于嚴(yán)格要求使用無(wú)動(dòng)物源性的特殊細(xì)胞或組織的消化。此外本產(chǎn)品含EDTA和酚紅指示劑。

儲(chǔ)存與運(yùn)輸

冰袋運(yùn)輸；4℃避光保存，12個(gè)月有效；短期不使用情況下，建議-20℃保存，可保存更長(zhǎng)時(shí)間。

操作步驟

注意：以下方案主要用于貼壁細(xì)胞。對(duì)于組織消化，需要先將組織剪碎成合適大小。不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

1. 去除細(xì)胞原培養(yǎng)液，使用PBS、不含血清培養(yǎng)液或其他緩沖液洗滌細(xì)胞1-2次以去除殘余血清；

2. 加入適量重組胰蛋白酶消化液覆蓋細(xì)胞，于顯微鏡下進(jìn)行消化觀(guān)察，大多數(shù)細(xì)胞消化時(shí)間在30s-3min之間；對(duì)于難消化細(xì)胞，可放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育消化一定時(shí)間（ 消化時(shí)間僅供參考，具體消化時(shí)間需根據(jù)實(shí)際情況而定）；

3. 當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn)明顯收縮或形態(tài)變化時(shí)，吸除重組胰蛋白酶消化液，加入適量含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液終止消化（如果用移液槍輕輕吹打時(shí)很難使細(xì)胞從板底脫落，表明消化時(shí)間不夠，可加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。切忌避免過(guò)度消化）；

4. 細(xì)胞懸液收集置離心管，以800-1200 rpm/min 離心3-5 min，加入適量含血清的細(xì)胞培養(yǎng)液（可選）；

5. 輕輕吹打細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液，即可傳代培養(yǎng)或后續(xù)實(shí)驗(yàn)。