土壤脲酶（Solid-Urease，S-UE）測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)
For Research Use Only

僅供研究用
貨號(hào)：QYS-235084
分光光度法 50 管/24 樣

測(cè)定意義：

土壤脲酶（Solid-Urease，S-UE）測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)S-UE能夠水解尿素，產(chǎn)生氨和碳酸。土壤脲酶活性與土壤的微生物數(shù)量、有機(jī)物質(zhì)含量、全氮和*氮含量呈正相關(guān)。土壤脲酶活性反應(yīng)了土壤的氮素狀況。
測(cè)定原理：

利用靛酚藍(lán)比色法測(cè)定脲酶水解尿素產(chǎn)生的 NH3-N。

需自備的儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL 玻璃比色皿、研缽、冰、甲苯（不允許快遞）和蒸餾水。
土壤脲酶（Solid-Urease，S-UE）測(cè)定試劑盒說(shuō)明書(shū)試劑的組成和配制：

試劑一：甲苯 10mL×1 瓶，4℃保存；（自備）

試劑二：粉劑×1 瓶，臨用前加入 20mL 蒸餾水，充分溶解待用，4℃保存；用不完的試劑 4 ℃保存；
試劑三：液體 65mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四 A 液：液體 1mL×1 瓶，4℃保存；試劑四 B 液：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；臨用前將 A 液倒入 B 液中混合，待用；用不完的試劑 4℃保存一周；
試劑五：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
測(cè)定步驟：

1 、培養(yǎng)

        測(cè)定管        對(duì)照管
                
風(fēng)干土樣(g)        0.25        0.25
試劑一（μL）        125        125
    振蕩混勻，使土樣全部濕潤(rùn)，室溫放置 15min    
試劑二（μL）        625        
蒸餾水（μL）                625
試劑三（μL）        1250        1250
                

      混勻，放入 37℃水浴培養(yǎng) 24h 后，10000g 常溫離心 10min，取上清液。
2、將培養(yǎng)結(jié)束的上清液稀釋 10 倍（取 0.1mL 上清液，加入 0.9mL 蒸餾水）。
3、測(cè)氨量
    測(cè)定管    對(duì)照管
        
稀釋后的上清液（μL）    400    400
試劑四（μL）    80    80
試劑五（μL）    60    60
    充分混勻，室溫放置 20min    
蒸餾水（μL）    460    460

混勻， 578nm 處蒸餾水調(diào)零，測(cè) A 值，ΔA=A 測(cè)定管-A 對(duì)照管。每個(gè)測(cè)定管設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
脲酶活力計(jì)算
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定的回歸方程為 y = 0.0915x +0.0373；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（μg/mL），y 為吸光值。單位的定義：每天每 g 土樣中產(chǎn)生 1μg NH3-N 定義為一個(gè)酶活力單位。
脲酶活力（U /g 土樣）＝(ΔA-0.0373) ÷0.0915×10×V 反總÷W÷T =874×(ΔA -0.0373) 10：稀釋倍數(shù)；T：反應(yīng)時(shí)間，1d； V 反總：反應(yīng)體系總體積：2mL；W：樣本質(zhì)量，0.25g。