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上海極威生物科技有限公司
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保質期：六個月
品牌：國內(nèi)外ELISA試劑盒品牌
運輸：包郵（中國大陸）
犬游離甲狀腺素（FT4）ELISA試劑盒包裝形式：盒裝（液體盒裝）
ELISA實驗操作步驟的一般常見方法
方法一）用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法：
犬游離甲狀腺素（FT4）ELISA試劑盒，英文名： Dog free fatty acids,FFA ELISA kit
國內(nèi)統(tǒng)一規(guī)格：48T/96T
保質期：六個月
品牌：國內(nèi)外ELISA試劑盒品牌
運輸：包郵（中國大陸）
犬游離甲狀腺素（FT4）ELISA試劑盒包裝形式：盒裝（液體盒裝）
ELISA實驗操作步驟的一般常見方法
方法一）用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法：
1）包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1～10μg／ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。
2）加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3）加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。
4）加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5）終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6）結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
方法二）用于檢測未知抗體的間接法：
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6?！?/span>
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