ELSIA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，MAC Elisa kit特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的*，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線zui高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，MAC Elisa kit中央較呈直線的部分是的檢測(cè)區(qū)域。

MAC Elisa kit技術(shù)操作要點(diǎn)：

1. 標(biāo)本的采取和保存。
2. 試劑的準(zhǔn)備
3. 加樣。
4. 保溫。
5. 洗滌。
6. 顯色和比色。
7. 酶標(biāo)比色儀。
8. 結(jié)果判斷。

將抗原或抗體固定在過(guò)程稱為包被(coating)。換言之，包被即是抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面的過(guò)程。MAC Elisa kit蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過(guò)物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體表面的疏水基團(tuán)間的作用于。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點(diǎn)、濃度等的影響。載體對(duì)不同蛋白質(zhì)的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體表面。IgG對(duì)聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力，其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上，抗體結(jié)合點(diǎn)暴露于外，因此抗體的包被一般均采用直接吸附法。蛋白質(zhì)抗原大多也可采用與抗體相似的方法包被。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露，在這種情況下，MAC Elisa kit直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對(duì)該抗原的特異抗體作預(yù)包被，其后通過(guò)抗原抗體反應(yīng)使抗原固相化。此間接結(jié)合在固相上的抗原遠(yuǎn)離載體表面，其抗原決定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法，試驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改善，重復(fù)性亦佳。間接包被的另一優(yōu)點(diǎn)是抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至于/100。不易吸附在聚苯乙烯載體上的非蛋白質(zhì)抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測(cè)抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結(jié)合?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照射（例如30W紫外燈，75cm照射12小時(shí)），以增加其吸附性能。固相載體先用堿性蛋白質(zhì)，如聚賴氨酸、*等作預(yù)包被，也可提高核酸的結(jié)合力。也可用親和素*系統(tǒng)作間接包被，MAC Elisa kit即用親和素先包被載體，然后加入*化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴(kuò)大應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。

脂類物質(zhì)無(wú)法與固相載體結(jié)合，可將其在有機(jī)溶劑（例如乙醇）中溶解后加入ELISA板孔中，開(kāi)蓋置冰箱過(guò)夜或冷風(fēng)吹干，待酒精揮發(fā)后，讓脂質(zhì)自然干固在固相表面?？剐牧字贵w的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

MAC Elisa kit相關(guān)產(chǎn)品*：xyL979Hu    人核糖體蛋白S6激酶β1(RPS6Kβ1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Ribosomal Protein S6 Kinase Beta 1 (RPS6Kb1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB551Hu    人骨髓基質(zhì)細(xì)胞抗原1(BST1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Bone Marrow Stromal HZll Antigen 1 (BST1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE158Hu    人Saitohin蛋白(STH)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Saitohin (STH)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyG007Hu    人腺苷A2b受體(ADORA2b)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Adenosine A2b ReHZptor (ADORA2b)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyG292Hu    人鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶激活因子2B(GUCA2B)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Guanylate Cyclase Activator 2B (GUCA2B)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyQ648Hu    人防御素β112(DEFβ112)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Defensin Beta 112 (DEFb112)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyB278Hu    人IgG-Fc片段低親和力受體Ⅲa(FcγR3A)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Fc Fragment Of IgG Low Affinity IIIa ReHZptor (FcgR3A)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyH334Hu    人旁血小板溶蛋白(PPL)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Periplakin (PPL)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyJ982Hu    人Engrailed同源框蛋白2(EN2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Engrailed Homeobox Protein 2 (EN2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyL548Hu    人膠質(zhì)細(xì)胞系來(lái)源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α1(GFRα1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Glial HZll Line Derived Neurotrophic Factor ReHZptor Alpha 1 (GFRa1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC176Hu    人多聚A特異性核糖核酸酶(PARN)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Poly A Specific Ribonuclease (PARN)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC390Hu    人氯化物細(xì)胞內(nèi)通道蛋白1(CLIC1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Chloride IntraHZllular Channel Protein 1 (CLIC1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC758Hu    人醌型二氫蝶啶還原酶(QDPR)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Quinoid Dihydropteridine Reductase (QDPR)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyE398Hu    人肌酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(CRT)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Creatine Transporter (CRT)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC066Hu    人雙氧化酶2(DUOX2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Dual Oxidase 2 (DUOX2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC527Hu    人組蛋白H1(H1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Histone H1 (H1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyC750Hu    人苯*羥化酶(PAH)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Phenylalanine Hydroxylase (PAH)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyD009Hu    人蘇氨酰tRNA合成酶(TARS)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Threonyl tRNA Synthetase (TARS)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyJ038Hu    人γ-谷氨酰水解酶(γGH)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Gamma-Glutamyl Hydrolase (gGH)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyV381Hu    人胃泌酸調(diào)節(jié)素(OXM)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Oxyntomodulin (OXM)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyG326Hu    人硒結(jié)合蛋白1(SELENBP1)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Selenium Binding Protein 1 (SELENBP1)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyD152Hu    人衰老關(guān)鍵蛋白2(FBLN2)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Fibulin 2 (FBLN2)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml    
xyA923Hu    人趨化因子C-X-C-基元受體5(CXCR5)檢測(cè)試劑盒    ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif ReHZptor 5 (CXCR5)     檢測(cè)范圍：9.375-1000pg/ml