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Elisa試劑盒
細(xì)胞系
生化試劑
進(jìn)口PCR試劑盒
ELISA檢測(cè)試劑盒
質(zhì)粒
熒光定量PCR試劑盒
標(biāo)準(zhǔn)品
ATCC細(xì)胞
檢測(cè)試劑盒
科研菌種
原代細(xì)胞
細(xì)胞培養(yǎng)
抗體

巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒標(biāo)本要求和操作步驟

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巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒標(biāo)本要求和操作步驟
標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。 
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干
5.  溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
8. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
9.
巨噬細(xì)胞炎性蛋白2Elisa試劑盒終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

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