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貨號	E1898	規(guī)格	1×106cells
種屬	人	生長特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣

LNCaP人前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞系

英文名稱	LNCaP	規(guī)格	1×106cells
種屬	人	生長特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣	貨號	E1898
用途	僅供科研研究實驗	貨期	現(xiàn)貨

LNCaP人前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞系

別稱 LNCaP-Clone-FGC; LNCaP.FGC; LNCaP-FGC; LNCaP FGC; LNCaP-ATCC

種屬人類

年齡（性別）男性，50歲

組織來源前列腺；左鎖骨淋巴結(jié)癌轉(zhuǎn)移灶

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述人前列腺癌細(xì)胞LNCaP clone FGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結(jié)針刺活檢中分離，該患者經(jīng)確診為前列腺癌轉(zhuǎn)移。LNCaP clone FGC細(xì)胞對5-α-二氫睪酮(生長調(diào)節(jié)子和酸性磷酸脂酶產(chǎn)物)有響應(yīng)。

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時間 ~32-36小時

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, in soft agar.Yes, the cells are tumorigenic in nude mice.

受體表達(dá)情況 androgen receptor, positive;estrogen receptor, positive

基因表達(dá)情況 human prostatic acid phosphatase; prostate specific antigen

注意事項 1）該細(xì)胞并不形成一致的單層，而是形成集落。（2）該細(xì)胞會使培養(yǎng)基快速變酸，且生長緩慢，故傳代后 48 小時內(nèi)不應(yīng)擾動；（3）普通TC處理的培養(yǎng)瓶或皿不能使細(xì)胞很好的貼壁，培養(yǎng)難度較高，需使用 Corning 的 cellbind 細(xì)胞培養(yǎng)瓶（貨號是 3289），或者使用多聚-L-賴氨酸溶液（貨號 PB180523）包被過的培養(yǎng)皿；（4）在細(xì)胞運輸途中，多數(shù)細(xì)胞會從培養(yǎng)瓶底分離，大片懸浮在培養(yǎng)基中，按照收貨注意事項處理即可恢復(fù)正常。

保藏機構(gòu) ATCC; CRL-1740 BCRC; 60088 BCRJ; 0149 ECACC; 89110211

LNCaP人前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞系

1)復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定)，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3)細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

LNCaP人前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞系

人肺微血管平滑肌	DMS 114人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
人主動脈內(nèi)皮細(xì)胞	HBE135-E6E7人支氣管上皮細(xì)胞
大鼠骨骼肌細(xì)胞	HEL人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞
人臍動脈平滑肌細(xì)胞	HMEC-1人微血管內(nèi)皮細(xì)胞株
小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞	HUT-78人T淋ba細(xì)胞白血病細(xì)胞
大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞	Karpas-299人間變性大細(xì)胞淋ba瘤細(xì)胞
人主動脈平滑肌細(xì)胞	LOVO+LUC人結(jié)直腸癌細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記
小鼠冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞	MDA-MB-436人乳腺癌細(xì)胞
大鼠冠狀動脈內(nèi)皮細(xì)胞	MT-4人急性淋ba母細(xì)胞白血病細(xì)胞
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞	NCI-H292人肺癌細(xì)胞(淋ba結(jié)轉(zhuǎn)移)
人臍動脈內(nèi)皮細(xì)胞	NPC/HK-1人鼻咽癌細(xì)胞
小鼠滑膜細(xì)胞	ProPakA.6人胚腎細(xì)胞
大鼠滑膜細(xì)胞	LNCaP人前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞系sh-sy5y人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞	SK-OV-3人卵巢癌細(xì)胞
小鼠骨骼肌細(xì)胞	SW620人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞

LNCaP人前列腺癌細(xì)胞細(xì)胞系

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否*揮發(fā)，細(xì)胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。.觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代。

9. 注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。