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樹鼩肺成纖維樣細胞;TSHL3

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所  在  地上海市

更新時間:2021-04-06 10:10:45瀏覽次數:690次

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產品名稱

樹鼩肺成纖維樣細胞;TSHL3

生長特性

貼壁生長

貨號

EY-X63811

細胞名稱  樹鼩肺成纖維樣細胞;TSHL3
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞系來源于一雄性樹鼩的肺組織。2003年由中國科學院昆明細胞庫建立。

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次

傳代情況: P4

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 熒光法(-)
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產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 
培養(yǎng)操作步驟
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
金屬肽酶含血小板反應蛋白12檢測試劑盒細胞名稱: 人內膜腺癌細胞;HEC-1-B形態(tài)特性: 上皮細胞樣A Disintegrin And Metalloprotease 12

RHOG檢測試劑盒細胞名稱: 人皮膚鱗癌細胞;A-431[A431]形態(tài)特性: 上皮細胞樣Rho-related GTP-binding protein RhoG

ARHGAP9檢測試劑盒細胞名稱: 草魚肝臟細胞;L8824形態(tài)特性: 上皮細胞樣Rho GTPase activating protein 9

ARHGAP4檢測試劑盒細胞名稱: 團頭魴尾鰭細胞;WCF形態(tài)特性: 上皮細胞樣Rho GTPase activating protein 9

LYN檢測試劑盒細胞名稱: 草魚腎細胞;GIK形態(tài)特性: 上皮細胞樣Tyrosine-protein kinase Lyn

a2-6半乳糖的唾液寡糖檢測試劑盒細胞名稱: 白鰱尾鰭細胞系;SCF形態(tài)特性: 上皮細胞樣SA a2-6gal

α2,6-半乳糖唾液檢測試劑盒細胞名稱: 散鱗鏡鯉尾鰭細胞;YZ21形態(tài)特性: 上皮細胞樣a2-6gal sialic acid

三氧胺檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠肝癌細胞;H22形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣tamoxifen

游離檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠纖維肉瘤細胞;WEHI164形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Urinary free cortisol

胃動蛋白2檢測試劑盒細胞名稱: 鯉魚尾鰭細胞;YZ16形態(tài)特性: 上皮細胞樣Gastrokine 2

分泌性熱休克蛋白90檢測試劑盒細胞名稱: 人前列腺癌細胞;PC-3[PC3]形態(tài)特性: 上皮細胞樣Secreted heat shock protein 90

20羥二十碳四烯檢測試劑盒細胞名稱: 人急性單核細胞白血病細胞;THP-1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣20 hydroxyl twenty carbon four acid

19羥二十碳四烯檢測試劑盒細胞名稱: 人神經膠質細胞瘤細胞;U251形態(tài)特性: 成纖維細胞樣19 hydroxyl twenty carbon four acid

西尼羅病抗體檢測試劑盒細胞名稱: 大鼠肝細胞瘤;H-4-II-E形態(tài)特性: 上皮細胞樣West Nile Virus antibody

西尼羅病抗原檢測試劑盒細胞名稱: 人上皮細胞;CaSki形態(tài)特性: 上皮細胞樣West Nile Virus antigen

5,6-EET檢測試劑盒細胞名稱: 人纖維肉瘤細胞;HT-1080形態(tài)特性: 上皮細胞樣5,6-EET

8,9-EET檢測試劑盒細胞名稱: 人內膜腺癌細胞;RL95-2形態(tài)特性: 上皮細胞樣8,9-EET
樹鼩肺成纖維樣細胞;TSHL3DNA酶甲基綠瓊脂基礎規(guī)格:100g用途:用于彎曲桿菌的DNA酶水解試驗(GB標準)需添加甲基綠溶液

明膠規(guī)格:20支詳情介紹

綠膿菌素測定培養(yǎng)基(PDP)規(guī)格:250g用途:用于綠膿桿菌的綠膿菌素測定試驗(GB標準)

腸桿菌科細菌成套生化鑒定管規(guī)格:16種/盒*10盒用途:用于腸桿菌科細菌的生化鑒定,包括半固體瓊脂,鳥氨脫羧酶肉湯,賴氨脫羧酶肉湯,氨基脫羧酶對照,西蒙氏枸櫞鹽,硫化氫,蛋白胨水(色氨肉湯),MR-VP(2支),丙氨,,肌醇,,蜜二糖,核糖醇(側金盞花醇),棉子糖共17種生化鑒定管和配套試劑(甲基紅試劑,V-P試劑,F(xiàn)eCl3,液體石蠟,靛基質試劑)(需甲基紅試劑盒、V-P試劑盒、Kovace靛基質試劑盒配套使用。)

卵黃多粘菌素瓊脂基礎(MYP)規(guī)格:50%卵黃乳液用途:5ml

色氨肉湯規(guī)格:20支詳情介紹

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