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上海一研生物科技有限公司
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人原代脾臟單核細胞專用培養(yǎng)基

參  考  價:1 - 3600 /件
具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 型號

  • 品牌

    其他品牌

  • 廠商性質(zhì)

    代理商

  • 所在地

    上海市

更新時間:2025-02-24 09:09:09瀏覽次數(shù):1844次

聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線
級別 其他 規(guī)格 100mL/500mL
貨號 EY-XP5117 貨期 現(xiàn)貨
用途 僅供科研實驗
人原代脾臟單核細胞專用培養(yǎng)基的相關產(chǎn)品:人原代蛻膜腺成纖維細胞人原代臍靜脈平滑肌細胞兔原代B淋巴細胞人原代橫紋肌細胞小鼠原代胸腺基質(zhì)細胞人原代支氣管上皮細胞大鼠原代棕色脂肪干細胞大鼠原代杏仁核神經(jīng)元細胞小鼠原代卵巢顆粒細胞兔原代腦動脈血管內(nèi)皮細胞大鼠原代牙齦上皮細胞大鼠原代結膜上皮細胞人原代肝實質(zhì)細胞小鼠原代腸肌成纖維細胞豬原代主動脈平滑肌細胞

商品描述:

人原代脾臟單核細胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品名稱

人原代脾臟單核細胞專用培養(yǎng)基

規(guī)格

100mL/500mL

用途

僅供科研研究實驗

貨號

EY-XP5117

人原代脾臟單核細胞專用培養(yǎng)基由團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人原代脾臟單核細胞的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含人原代脾臟單核細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人原代脾臟單核細胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

名稱

體積

濃度

保存條件

原代巨噬細胞基礎培養(yǎng)基

500mL

4℃、避光

原代巨噬細胞培養(yǎng)添加劑

5mL

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS)

25mL

終濃度5%

-20℃、避光

雙抗(青霉su/鏈霉su,P/S)

5mL

100×

-20℃、避光

 

運輸和保存

運輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法:按照對應保存條件保存12個月,配置好的培養(yǎng)基2℃~8℃,保存2個月;

質(zhì)量控制

檢測項目

質(zhì)量控制

澄清度

澄清

PH

7.3±0.2

內(nèi)毒素含量 (EU/mL)

≤10

無菌檢測

細菌

陰性

真菌

陰性

支原體

陰性

細胞生長試驗

細胞形態(tài)

正常

細胞生長實驗

合格



人原代脾臟單核細胞專用培養(yǎng)基

注意事項:
人原代脾臟單核細胞專用培養(yǎng)基
僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì),請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來水沖洗即可。

細胞培養(yǎng)步驟:
人原代脾臟單核細胞專用培養(yǎng)基

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:

1) 準備DMEM-H培養(yǎng)基(添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基,使293T細胞懸浮生長。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二. 細胞處理:

1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

人原代脾臟單核細胞專用培養(yǎng)基

公司正在出售的產(chǎn)品:
人原代脾臟單核細胞專用培養(yǎng)基

兔股骨頭微血管內(nèi)皮細胞

小鼠原代膽囊上皮細胞專用培養(yǎng)基

B淋巴細胞

重組人轉化生長因子RH TGF-β1

兔脾淋巴細胞

成纖維細胞生長因子

兔骨髓巨噬細胞

組人表皮生長因子

T淋巴細胞

重組人粒巨噬細胞集落刺激因子

兔單核細胞

血管內(nèi)皮生長因子

DC細胞

組人白細胞介素-2(凍干粉GMP級)

NK細胞

重組小鼠白細胞介素-2

兔內(nèi)皮祖細胞

白介素-3

兔脾基質(zhì)細胞

組人胰島素

正常人EBV-轉化淋巴細胞

組人白細胞介素-4 

兔淋巴管內(nèi)皮細胞

組人白細胞介素-4

兔淋巴管成纖維細胞

組人白介素-13

兔骨髓肥大細胞

重組大鼠血管內(nèi)皮生長因子 VEGF 164

兔骨髓單核細胞

人轉化生長因子B3 

操作要點:

人原代脾臟單核細胞專用培養(yǎng)基
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。

2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內(nèi)。

4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。

5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。

6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。



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