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黃牛皮膚細胞;BTA-S2

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產(chǎn)品型號

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地上海市

更新時間:2021-04-06 09:58:27瀏覽次數(shù):714次

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實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號

黃牛皮膚細胞;BTA-S2

貼壁生長

EY-X63783

?
細胞名稱  黃牛皮膚細胞;BTA-S2
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞系來源于一雄性黃牛的皮膚組織。2004年由中國科學院昆明細胞庫建立。

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS

傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次

傳代情況: P2

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 熒光法(-)
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
M3抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人臍靜脈內(nèi)皮細胞;HUV-EC形態(tài)特性: 上皮細胞樣Ganglioside M3 antibody

腎上腺素能a1A受體檢測試劑盒細胞名稱: 人慢性髓系白血病細胞;K562形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣;圓形adrenergic alpha-1A receptor

腎上腺髓質(zhì)素原檢測試劑盒細胞名稱: IL-2依賴的人淋巴T細胞系;Kit225-k6形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣pro-adrenomedullin

腎小球足細胞裂隙膜蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人導管瘤細胞;BT-474形態(tài)特性: 上皮樣;圓形、成團Podocin

生長分化因子3檢測試劑盒細胞名稱: 黑人Burkitt淋巴瘤細胞;Raji形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣growth differentiation factor 3

生長分化因子5檢測試劑盒細胞名稱: 人急性髓性白血病細胞;KG-1a形態(tài)特性: 骨髓瘤細胞樣growth differentiation factor 5

生長激素促分泌素受體內(nèi)源性配體檢測試劑盒細胞名稱: 人結(jié)直腸癌細胞;DiFi形態(tài)特性: 上皮樣ghrelin

生長抑制DNA損傷基因檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠纖維肉瘤細胞;WEHI-13VAR形態(tài)特性: 成纖維細胞樣PPP1R15A;GADD34

視錐蛋白樣蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 人T淋巴細胞白血病細胞;C8166形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Visinin Like Protein 1

嗜環(huán)蛋白;親環(huán)素B檢測試劑盒細胞名稱: 人T淋巴瘤細胞;HUT102形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣cyclophilin B

嗜細胞活化趨化因子3檢測試劑盒細胞名稱: 人B淋巴細胞;WIL2-S[WIL2S]形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Eotaxin-3;CCL26

嗜異性抗體檢測試劑盒細胞名稱: 敘利亞倉鼠腎細胞;BHK-21形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Forssman antibody

受體TNFRSF結(jié)合絲氨蘇氨激酶2檢測試劑盒細胞名稱: 抗肺炎支原體單克隆抗雜交瘤細胞株;MP-H5形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2

舒*檢測試劑盒細胞名稱: 抗副甲型沙門氏菌單克隆抗體雜交瘤細胞株;PaSh-D3D7形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣*

衰老關鍵蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 抗單克隆抗體雜交瘤細胞株;PenS-4C1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Fibulin 1

雙糖鏈蛋白聚糖檢測試劑盒細胞名稱: 抗克羅特羅素單克隆抗體雜交瘤細胞株;CL形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣biglycan

水通道蛋白4抗體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Aquaporin 4 antibody
黃牛皮膚細胞;BTA-S2心浸液瓊脂規(guī)格:250g用途:用于培養(yǎng)營養(yǎng)要求高的微生物

藥敏紙片規(guī)格:5μg/片,20片/瓶用途:抗菌藥體外敏感試驗。

胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)(ISO9038-1-2000)規(guī)格:250g用途:用于大腸桿菌培養(yǎng)

血液增菌培養(yǎng)基規(guī)格:BR250g詳情介紹

含糖牛肉湯培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于乳菌培養(yǎng)

GVPC瓊脂基礎添加劑規(guī)格:5支/套用途:每套添加于100mlGVPC瓊脂中

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