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貨號 | E-XB6568 | 規(guī)格 | 1×106cells |
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種屬 | 人 | 生長特性 | 懸浮生長 |
細胞形態(tài) | 淋巴母細胞樣, |
商品詳情:
HBL-1 的 EBV 陰性 B 細胞淋巴瘤細胞系是從患有惡性淋巴瘤、彌漫性、大細胞的患者的胸腔積液中建立的。
1) 來源:日本人 男65歲 胸腔積液
2) 形態(tài):淋巴母細胞樣,懸浮生長
3) 含量:>1x106 細胞數(shù)
4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途:僅供科研使用。
商品屬性:
產品名稱 | HBL-1人彌漫大B淋巴瘤細胞 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6568 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 懸浮生長 | 細胞形態(tài) | 淋巴母細胞樣, |
細胞系培養(yǎng)步驟:
細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復蘇?:
將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中,加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yǎng)基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
?細胞凍存?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展,為科學研究提供了大量的細胞樣本?。
?細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復蘇?:
將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中,加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進行計數(shù),然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞凍存?:
當細胞密度達到80%~90%時,去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。
加入進行消化,放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展,為科學研究提供了大量的細胞樣本?
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細胞接收后的處理:
1)HBL-1人彌漫大B淋巴瘤細胞收到細胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。
2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據
3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備MEM培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
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