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貨號(hào)	E-XB6464	規(guī)格	1×106cells
種屬	人	生長(zhǎng)特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮樣細(xì)胞樣,

HLE-B3人晶狀體上皮細(xì)胞

人晶狀體上皮細(xì)胞人HLE-B3細(xì)胞又名B-3細(xì)胞，該細(xì)胞系來(lái)源于接受早產(chǎn)兒視網(wǎng)膜病變治療的 5-12 個(gè)月大患者的晶狀體組織分離的上皮樣細(xì)胞，該晶狀體在 24 小時(shí)內(nèi)采集。在 60% 融合度時(shí)，第 3 代細(xì)胞被 Ad12-SV40 感染。通過(guò)免疫印跡試驗(yàn)監(jiān)測(cè)細(xì)胞合成β和γ晶狀體蛋白。這些細(xì)胞在培養(yǎng)中可以維持超過(guò)76次群體倍增，而增殖能力不會(huì)降低。

1）來(lái)源： 5-12 個(gè)月晶狀體組織

2）形態(tài)：上皮樣細(xì)胞樣,貼壁生長(zhǎng)

3）含量：>1x106 細(xì)胞數(shù)

4）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

5) 用途：僅供科研使用。

HLE-B3人晶狀體上皮細(xì)胞

英文名稱	人晶狀體上皮細(xì)胞	規(guī)格	1×106cells
種屬	人	生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)	上皮樣細(xì)胞樣,	貨號(hào)	E-XB6464
用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)	貨期	現(xiàn)貨

HLE-B3人晶狀體上皮細(xì)胞

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否*揮發(fā)，細(xì)胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。.觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代。

9. 注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。

HLE-B3人晶狀體上皮細(xì)胞

1)復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定)，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3)細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 HLE-B3人晶狀體上皮細(xì)胞

HLE-B3人晶狀體上皮細(xì)胞

大鼠腦微血管周細(xì)胞	小鼠牙齦成纖維細(xì)胞
P19小鼠畸胎瘤細(xì)胞	兔氣管上皮細(xì)胞
RM-1+LUC小鼠前列腺癌細(xì)胞熒光酶標(biāo)記	兔腹腔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞
SDOW-17小鼠雜交瘤	兔小腸平滑肌細(xì)胞
P388D1小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞	兔腸巨噬細(xì)胞
P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞	兔腎近端小管上皮細(xì)胞
panc02小鼠胰腺癌細(xì)胞	兔卵巢顆粒細(xì)胞
SVEC4-10小鼠淋巴結(jié)血管上皮樣細(xì)胞	兔乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞
TC-1小鼠肺上皮細(xì)胞	兔滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞
RAG小鼠腎腺癌細(xì)胞	兔淋ba管內(nèi)皮細(xì)胞
RAW 264.7小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞	兔腦血管成纖維細(xì)胞
RAW 264.7+GFP小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞+GFP	兔脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞
Renca 小鼠腎癌細(xì)胞	HLE-B3人晶狀體上皮細(xì)胞兔胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞
RGC-5小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞	豬輸尿管成纖維細(xì)胞
RM-1小鼠前列腺癌細(xì)胞	羊肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞