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人睪丸支持細(xì)胞永生化

參  考  價(jià):600 - 6800 /件
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貨號(hào) E-XB6570 規(guī)格 1×106cells
種屬 生長(zhǎng)特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,
人睪丸支持細(xì)胞永生化公司正在出售的產(chǎn)品:L1210細(xì)胞L132人胚胎肺上皮細(xì)胞L15 培養(yǎng)基L15基礎(chǔ)培養(yǎng)基L2 (大鼠肺泡上皮細(xì)胞)L2大鼠肺上皮細(xì)胞L363人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞L428人經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤細(xì)胞

商品屬性:

產(chǎn)品名稱

人睪丸支持細(xì)胞永生化

鑒定

STR鑒定正確

貨號(hào)

E-XB6570

種屬

生長(zhǎng)特性

貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞形態(tài)

梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,




人睪丸支持細(xì)胞永生化

商品詳情:
睪丸是一種免疫豁免器官。睪丸支持細(xì)胞又稱Sertoli細(xì)胞,是睪丸的主要組成細(xì)胞,在精子發(fā)生和成熟過程中,具有支持、保護(hù)和營(yíng)養(yǎng)生精細(xì)胞作用,可分泌雄激素結(jié)合蛋白、抑制素等,相鄰Sertoli細(xì)胞之間形成的緊密連結(jié)是構(gòu)成睪屏障的主要結(jié)構(gòu)。

1) 組織來源于人的正常睪丸組織。

2) 細(xì)胞鑒定:GATA4或FasL或Vimentin免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3) 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5) 細(xì)胞生長(zhǎng)方式:梭形細(xì)胞,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。
細(xì)胞系培養(yǎng)步驟:

細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。

細(xì)胞復(fù)蘇?:

將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。

將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細(xì)胞傳代?:

當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。

加入進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入適量DME培養(yǎng)基終止消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?:

當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。

加入行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。

這些步驟確保了細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴(kuò)展,為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本?。

?細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。

人睪丸支持細(xì)胞永生化 

細(xì)胞復(fù)蘇?:

將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。

將融化的細(xì)胞移入離心管中,加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中(其中胎牛血清約為10%),輕輕吹勻,離心,500g離心2min,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,制成細(xì)胞懸液,接種于培養(yǎng)皿/瓶中,在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

細(xì)胞傳代?:

當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。

加入進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基,輕輕吹打混勻,吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù),然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

細(xì)胞凍存?:

當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí),去掉培養(yǎng)基,用1X PBS清洗2次。

加入進(jìn)行消化,放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。

加入DMEM培養(yǎng)基終止消化,轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min,棄上清液,再加入DMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。

這些步驟確保了細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴(kuò)展,為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本?

細(xì)胞接收后的處理:

1)人睪丸支持細(xì)胞永生化收到細(xì)胞后,75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2)請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)

3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。

4)備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。  收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。                      

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基;胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

人睪丸支持細(xì)胞永生化 

公司正在出售的產(chǎn)品:

大鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞

MG63人骨肉瘤細(xì)胞

DC細(xì)胞

NCI-H1299人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

兔腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

NCI-H508人結(jié)腸直腸腺癌細(xì)胞

兔腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞

OE19人食管細(xì)胞

NK細(xì)胞

REH人急性非B非T淋ba細(xì)胞白血病細(xì)胞

兔內(nèi)皮祖細(xì)胞

SK-BR-3+LUC人乳腺癌細(xì)胞

兔脾基質(zhì)細(xì)胞

Snu-387人肝癌細(xì)胞

兔脊髓神經(jīng)元細(xì)胞

T24人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞

兔雪旺細(xì)胞

U87MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤

兔淋巴管成纖維細(xì)胞

KM9304轉(zhuǎn)化人淋ba細(xì)胞

兔骨髓肥大細(xì)胞

Jurkat白血病

兔骨髓單核細(xì)胞

P31/FUJ白血病

兔脾淋巴細(xì)胞

ZC-79001草魚吻皮細(xì)胞

兔骨髓巨噬細(xì)胞

CTX-TNA2大鼠腦星形膠質(zhì)細(xì)胞

兔脊髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞

Pt K1 (NBL-3)袋鼠腎細(xì)胞

 


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