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乳腺癌細(xì)胞;BC-024

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產(chǎn)品型號

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所  在  地上海市

更新時間:2021-04-07 16:26:32瀏覽次數(shù):668次

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公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號

乳腺癌細(xì)胞;BC-024

貼壁生長

EY-X63674

細(xì)胞名稱  乳腺癌細(xì)胞;BC-024
形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞

生長特性: 貼壁生長

特征特性: BC-024乳腺癌細(xì)胞由中國人種乳腺癌組織經(jīng)培養(yǎng)選擇獲得,于2007年建立鑒定,是乳腺癌基礎(chǔ)研究和臨床研究的材料。

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;50u/ml試劑胰島素

傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況: C21

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Crebanine

CAS No.:25127-29-1

中文名:克班寧

分子式:C20H21NO4

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WNT7A  原癌基因wnt7a蛋白抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Enoxacin

BLK/MODY11  B淋巴細(xì)胞酪激酶抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Ofloxacin

COG1  COG1蛋白抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Ofloxacin

BAP31  BAP31蛋白抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Abacavir

ADORA1/Adenosine A1 Receptor  腺苷A1受體抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Abacavir

SDHB  鉻細(xì)胞瘤患者抑癌基因SDHB抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Nicotinamide

ApoER2  載脂蛋白E2受體抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Nicotinamide

CRMP1  二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白1抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Cyproterone acetate

葡萄糖脫氫酶  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:GlucoseDehydrogenase  含量:BR,98%

葡萄糖酶  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Glucoseoxidase  含量:BR,50u/mg

葡萄籽提取物  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:GrapeSeedExtract  含量:AR,99%

蒲桃  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Pimelicacid  含量:高純,99%

普鈣  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Calciumhypophosphitemonohydrate  含量:CP,99%

七水合二  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:SSodiumphosphatedibasicheptahydrate  含量:CP

七縮五硼銨  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Ammoniumpentaborate  含量:CP,98%

漆酶  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:LaccasefromRhusvernificera  含量:BR,5u/ul

汽巴藍(lán)F3GA  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:CibacronBlueF3GA  含量:高純

鉛白  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Lead(II)carbonate  含量:CP,95%
乳腺癌細(xì)胞;BC-024營養(yǎng)瓊脂斜面規(guī)格:250g用途:用于細(xì)菌的純化培養(yǎng)

改良Skirrow氏肉湯規(guī)格:FBP溶液用途:1ml每支含量

改良Skirrow瓊脂添加劑規(guī)格:1ml*5支用途:每支添加于100ml改良Skirrow氏肉湯中

改良BPLS瓊脂規(guī)格:250g用途:用于各種標(biāo)本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(ISO標(biāo)準(zhǔn))

乳菌/雙歧桿菌顯色培養(yǎng)基規(guī)格:1000ml用途:用于乳菌/雙歧桿菌的顯色培養(yǎng)

Bolton肉湯規(guī)格:250g用途:用于空腸彎曲菌的增菌(GB標(biāo)準(zhǔn))
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

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