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乳腺癌細(xì)胞;BC-028

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更新時(shí)間:2021-04-07 16:18:44瀏覽次數(shù):1150次

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產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 
細(xì)胞名稱  乳腺癌細(xì)胞;BC-028
形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞

生長特性: 貼壁生長

特征特性: BC-028乳腺癌細(xì)胞由中國人種乳腺癌組織經(jīng)培養(yǎng)選擇獲得,于2007年建立鑒定,是乳腺癌基礎(chǔ)研究和臨床研究的材料。

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;50u/ml試劑胰島素

傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況: C9

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 陰性?

產(chǎn)品名稱

乳腺癌細(xì)胞;BC-028

生長特性

貼壁生長

貨號

EY-X63677

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),產(chǎn)品名稱貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。
培養(yǎng)操作步驟
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí); 
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
Pterolactam

CAS No.:38072-88-7

中文名:

分子式:C5H9NO2

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二十碳五酯 訂購|咨詢  載脂蛋白C2(APOC2) 規(guī)格: 約1ml/支,10.3mg/支

ID4  DNA結(jié)合抑制因子4抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Exemestane

IGF2R/M6PR/CD222/Mannose 6 Phosphate Receptor  胰島素樣生長因子2受體抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Amidopyrine/aminopyrine

KD1/Kv4.1  電壓門控通道Kv4.1抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Angiotensin II

GIRK1  G蛋白激活內(nèi)向通道1抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Vitamin D3

GIRK3/KJ9  G蛋白激活內(nèi)向通道3抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Pazopanib HCl

KK9/KK3  敏感離子通道蛋白3抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Tiotropium bromide anhydrous

KN4  鈣激活通道蛋白4抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Formoterol fumarate

LGR4/GPR48  G蛋白偶聯(lián)受體48抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Formoterol fumarate

青石棉  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Asbestosacidwashed  含量:AR,99.8%

青鮮素鉀  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Maleichydrazidepotassiumsalt  含量:BR,98%

青鮮素  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:MaleicHydrazide  含量:USP級,95%

輕質(zhì)碳鈣  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Calciumcarbonate  含量:CP,99%

輕質(zhì)碳鎂  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Magnesiumcarbonatehydroxide  含量:BR

氫桂皮  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:3Phenylpropanoicacid  含量:AR,98.5%

氫麥芽糖  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Maltitol  含量:BR,冷水可溶

 進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Hydroquinone  含量:ACS,99%

氫鎘  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Cadmiumhydroxide  含量:CP,72%

氫鉛  進(jìn)口、國產(chǎn)  英文名稱:Leadhydroxide  含量:LR,95%
人乳腺癌細(xì)胞;BC-028緩沖蛋白胨水(BPW)規(guī)格:250g用途:用于阪崎桿菌前增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))

哥倫比亞血瓊脂規(guī)格:用途:用于溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)(GB4789.11-2014)

酪蛋白葡萄糖瓊脂規(guī)格:250g用途:用于霉菌、酵母菌等的分離培養(yǎng)

緩沖動力-硝鹽培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的動力和硝鹽還原試驗(yàn)

性肉湯規(guī)格:250g用途:用于性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗(yàn)

沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于真菌的培養(yǎng)

 

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