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上海一研生物科技有限公司
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非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2021-04-02 11:24:33瀏覽次數(shù):832次

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公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:

產(chǎn)品名稱

生長(zhǎng)特性

貨號(hào)

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2

貼壁生長(zhǎng)

EY-X63660

細(xì)胞名稱  非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2
形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞

生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)

特征特性: Vero-HCV-E2細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的E2基因,能穩(wěn)定表達(dá)E2蛋白,是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室于2008年構(gòu)建并保存。

培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代

傳代情況: C40

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè): 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Paniculidine B

CAS No.:97399-94-5

中文名:

分子式:C14H19NO2

佛手柑內(nèi)酯 訂購(gòu)|咨詢  前列腺素E合酶(PTGES) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

大葉茜草素 訂購(gòu)|咨詢  前列腺素E合酶2(PTGES2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg

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EZH1/Histonelysine Nmethyltransferase EZH1  組蛋白賴N甲基EZH1抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ketotifen fumarate

phosphoKMT6/EZH2(Thr487)  抑癌蛋白EZH2抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Ketotifen fumarate

SKALP/Elafin  彈性蛋白酶抑制劑抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ketorolac

Epsti1/Epithelial Stromal Interaction 1  上皮間質(zhì)相互作用蛋白1抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Leflunomide

EIG121  雌激素誘導(dǎo)基因121蛋白抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Leflunomide

FAM129A/Cell growth inhibiting gene 39 protein  細(xì)胞生長(zhǎng)抑制基因39蛋白抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Levofloxacin Hemihidrated

FOLH1B  細(xì)胞生長(zhǎng)抑制蛋白26抗體(前列腺特異性膜抗原樣蛋白)    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Levofloxacin Hemihidrated

GCET2  生發(fā)中心B淋巴細(xì)胞相關(guān)蛋白2抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Lornoxicam

馬尿酰組酰亮  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:NHippurylHisLeuhydrate  含量:BR,98%

嗎啉磺  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:MES  含量:IND

嗎啉磺  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:MESsodiumsalt  含量:BR

麥角甾  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:Ergosterol  含量:AR,99%

麥考酚  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:Mycophenolicacid  含量:BR

麥芽酶  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:MaltosePhosphorylase  含量:BR,120u/mg

麥芽糖糊精  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:Maltodextrin  含量:高純,95%

麥芽糖酶  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:γMDH  含量:BR,20u/ul

沒(méi)食子酯  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:Propylgallate  含量:BR

玫瑰紅B  進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)  英文名稱:RhodamineB  含量:BR,98%
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E21%NaCl規(guī)格:20支詳情介紹

三糖鐵管規(guī)格:5ml*20支/包用途:用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選

T1N3 肉湯規(guī)格:250g用途:用于霍亂弧菌的生長(zhǎng)試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))

CDC厭氧菌瓊脂規(guī)格:250g用途:用于厭氧菌分離培養(yǎng),使用時(shí)需添加羊血、化血紅素和1

抗生素檢定培養(yǎng)基1號(hào)(PH6.5-6.7)規(guī)格:250g用途:用于藥品抗生素效價(jià)測(cè)定

TSA表面接觸皿(6.5cm)規(guī)格:10個(gè)/包用途:用于環(huán)境、器皿、設(shè)備和表面的無(wú)菌檢測(cè)
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的  *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

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