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貨號	E-XB6180	規(guī)格	1×106cells
種屬	人	生長特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣

HuH-7(人肝癌細(xì)胞)細(xì)胞系

英文名稱	HuH-7	規(guī)格	1×106cells
種屬	人	生長特性	貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣	貨號	E-XB6180
用途	僅供科研研究實驗	貨期	現(xiàn)貨

HuH-7(人肝癌細(xì)胞)細(xì)胞系

別稱 HuH-7; HUH-7; HuH7; Huh7; HUH7; JTC-39; Japanese Tissue Culture-39

種屬人類

年齡（性別）男性

組織來源肝；肝癌

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述據(jù)說，HuH-7細(xì)胞可產(chǎn)甲胎蛋白、胰α抗體、血漿銅藍(lán)蛋白、纖維蛋白原、纖維粘連蛋白等。

生長培養(yǎng)基 DMEM＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

保藏機構(gòu) CCLV; CCLV-RIE 1079 JCRB; JCRB0403 KCB; KCB 200970YJ KCLB; 60104

HuH-7(人肝癌細(xì)胞)細(xì)胞系

1)復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定)，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。

c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

3)細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;

a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細(xì)胞計數(shù)。

b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識。

c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

HuH-7(人肝癌細(xì)胞)細(xì)胞系

大鼠氣管上皮細(xì)胞	兔氣管上皮細(xì)胞
兔滑膜細(xì)胞	牛骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞
兔膀胱平滑肌細(xì)胞	人肺泡巨噬細(xì)胞
人前列腺平滑肌細(xì)胞	人胸腺上皮細(xì)胞
人乳腺成纖維細(xì)胞	人胚腎細(xì)胞HEK-293A(STR鑒定正確)
小鼠頜下腺上皮細(xì)胞	人甲狀腺鱗癌細(xì)胞SW579(STR鑒定正確)
大鼠頜下腺上皮細(xì)胞	小鼠胚胎成骨細(xì)胞前體細(xì)胞MC3T3-E1（種屬鑒定）
兔肌源性干細(xì)胞	小鼠小腦細(xì)胞 C8-D1A（種屬鑒定）
人前列腺上皮細(xì)胞	二氫葉還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞CHO/dhFr-（種屬鑒定）
小鼠腮腺細(xì)胞	人食管鱗癌細(xì)胞KYSE-140(STR鑒定正確)
大鼠腮腺細(xì)胞	人骨肉瘤細(xì)胞SJSA-1 (STR鑒定正確)
兔膀胱成纖維細(xì)胞	人鼻咽癌細(xì)胞C666-1(STR鑒定正確)
人胰島β細(xì)胞	HuH-7(人肝癌細(xì)胞)細(xì)胞系人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCI-H3122(STR鑒定正確)
小鼠乳腺上皮細(xì)胞	Expi293F(STR鑒定正確)
大鼠乳腺上皮細(xì)胞	人乳腺癌細(xì)胞 HS 578T(STR鑒定正確)

HuH-7(人肝癌細(xì)胞)細(xì)胞系

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否*揮發(fā)，細(xì)胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。.觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代。

9. 注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。