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中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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鼠抗人肥大細(xì)胞類(lèi)單克隆抗體的制備過(guò)程

時(shí)間：2022/6/14閱讀：783
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鼠抗人肥大細(xì)胞類(lèi)單克隆抗體的制備過(guò)程：

1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫動(dòng)物：常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集：一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。

4. 免疫血清的純化與鑒定：得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。

5. 免疫血清的保存：抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。

SW626(人卵巢癌細(xì)胞)

T-24(人膀胱癌細(xì)胞)

T-47D(人乳腺管癌細(xì)胞)

T84(人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞)

Tca-8113(人舌鱗癌細(xì)胞)

TE-1(人食管癌細(xì)胞)

TF-1(人血液白血病細(xì)胞)

THP-1(人髓系白血病單核細(xì)胞)

TM3(小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞)

TSCCa(人舌鱗癌細(xì)胞)

U-2 OS(人骨肉瘤細(xì)胞)

U251(人膠質(zhì)瘤細(xì)胞)

U-87 MG(人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)

U-937(人組織細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞)

V79(倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)

VCaP(人前列腺癌細(xì)胞)

Vero(非洲綠猴腎細(xì)胞)

WI-38(人胚肺細(xì)胞)

WISH(人羊膜細(xì)胞)

Y1(Y-1) (小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞)

YAC-1(小鼠淋巴瘤細(xì)胞)

ZR-75-1(人乳腺癌細(xì)胞)

ZR-75-30(人乳腺癌細(xì)胞)


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