人BATF elisa試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2400pg/ml 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1200pg/ml 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

600pg/ml 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

300pg/ml 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

150pg/ml 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

計(jì)算

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

無(wú)水磷酸三鈉/三堿式磷酸鈉/原磷酸三鈉/磷酸三鈉/磷酸鈉/Trisodium phosphateAR，98%，500克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二羧酸鈉/4,4-二羧基-2,2-聯(lián)喹啉二鈉/2,2-聯(lián)喹啉-4,4-二甲酸二鈉/BCABR，98%5克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

D(-)酒石酸鈉/酒石酸鈉/D-酒石酸鈉/2,3-二羥基丁二酸鈉/D-(+)-Tartaric acid disodium saltAR，99%500克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

L(-)酒石酸鈉/酒石酸鈉/L-酒石酸鈉/L-(+)-Tartaric acid disodium saltAR，99%500克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

偏釩酸鈉/二水偏釩酸鈉/釩酸鈉/Sodium metavanadate dihydrateAR，99.9%，25克國(guó)產(chǎn)

無(wú)水偏釩酸鈉/釩酸鈉/Sodium metavanadateAR，99%，25克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

四苯硼鈉/四苯基硼酸鈉/四苯硼酸鈉/NaTBPAR；99%，10克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

氟化鈉/Sodium fluorideGR，99%，500克國(guó)產(chǎn)

氫氧化鈉/苛性鈉/燒堿/鈉氧條/苛性曹達(dá)/固堿/火堿/Sodium hydroxideGR，97%，500克國(guó)產(chǎn)

氟硼酸鈉/四氟硼鈉/四氟硼酸鈉/Sodium fluoroborateCP，98%，500克國(guó)產(chǎn)

六偏磷酸鈉/偏磷酸六鈉/格來(lái)漢氏鹽/卡甘/磷酸鈉玻璃/格臘哈姆鹽/六偏/六聚偏磷酸鈉/Sodium hexametaphoshpateCP，95%500克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

萘酚AS-MX磷酸鹽/色酚AS-MX磷酸鹽/磷酸萘酚AS-MX/Naphthol AS-MX phosphate高純，99%500毫克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

萘酚AS-BI磷酸二鈉/萘酚磷酸鈉/7-溴-N-(2-甲氧基苯基)-3-(磷酸氧基)萘-2-甲酰胺二鈉鹽/Naphthol AS-BI phosphate disodium saltBR，99.5%100毫克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

單硬脂酸甘油酯/硬脂酸甘油酯/單甘酯/甘油單硬酯酸酯/十八酸甘油酯/GMSCP100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

丁二酸二甲酯/琥珀酸二甲酯/琥珀酸甲酯/Dimethyl succinateCP，98%100毫升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

乙酰乙酸甲酯/乙酰醋酸甲酯/丁酮酸甲酯/β-丁酮酸甲酯/3-丁酮酸甲酯/MAACP，98%500毫升國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

對(duì)羥基苯甲酸甲酯/尼泊金甲酯/4-羥基苯甲酸甲酯/對(duì)羥基安息香酸甲酯/泊金M/尼泊金/Methyl 4-hydroxybenzoateCP，98.5%100克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口