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中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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F344胎鼠皮層神經(jīng)元*培養(yǎng)基?操作步驟

時(shí)間:2024/5/21閱讀:644
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F344胎鼠皮層神經(jīng)元*培養(yǎng)基操作步驟:

1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量,使的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。

2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。

特性:

1、細(xì)胞活力原代取材活力≥90產(chǎn)品復(fù)蘇率≥60培養(yǎng)兩天就能清晰看到軸突與樹突,培養(yǎng)時(shí)間可長(zhǎng)達(dá)13-16天。

2、細(xì)胞純度:80以上細(xì)胞神經(jīng)元細(xì)胞標(biāo)記物為陽(yáng)性

質(zhì)量控制:本產(chǎn)品經(jīng)過了細(xì)菌、真菌、霉菌、病毒(HIV、HBV、HCV)、支原體檢測(cè)。

運(yùn)輸保存:采用干冰保存運(yùn)輸


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