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中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒直接競(jìng)爭(zhēng)法

時(shí)間:2017/12/5閱讀:1148
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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒技術(shù)的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果,使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。

(1)直接競(jìng)爭(zhēng)酶標(biāo)抗原法測(cè)抗原

    樣本中的待測(cè)藥物和一定量的酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)與固相抗體結(jié)合,經(jīng)底物顯色后檢測(cè),樣本中藥物含量愈高,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原量愈少,zui后的顯色也愈淺。

(2)直接競(jìng)爭(zhēng)酶標(biāo)抗體法測(cè)抗原

    樣本中的待測(cè)藥物和固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合一定量的酶標(biāo)記抗體,經(jīng)底物顯色后檢測(cè),樣本中藥物含量愈高,結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗體愈少,zui后顯色也愈淺。

抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒直接競(jìng)爭(zhēng)法具體操作步驟如下:

1)抗原(或抗體)的固相化:將特異性抗原(或抗體)與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗原(或抗體),洗滌除去未結(jié)合的抗原(或抗體)及雜質(zhì)。

2)加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣本,再加入酶標(biāo)抗體(或酶標(biāo)抗原),保溫反應(yīng)。樣本中藥物與固相抗原(或酶標(biāo)抗原)同時(shí)競(jìng)爭(zhēng)與特異性抗體(或固相抗體)結(jié)合,形成固相抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物(或抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物)。洗滌除去游離物質(zhì)及吸附在固相載體上結(jié)合不緊密的物質(zhì)。

3)加底物顯色,固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。通過儀器檢測(cè)分析,測(cè)知樣本中抗原的量。
內(nèi)標(biāo)無含測(cè)    110791-9102    對(duì)二甲氨基苯甲醛    100mg
鑒別    110794-200504    土大黃苷    20mg
含量測(cè)定    110800-200404    吳茱萸內(nèi)酯    20mg
含量測(cè)定    110803-200605    華蟾酥毒基    20mg
含量測(cè)定    110806-200704        30mg
含量測(cè)定    110811-200704    血竭素高氯酸鹽    20mg
含量測(cè)定    110812-200506    10-羥基-2-癸烯酸    50mg
鑒別    110815-200707    牛磺膽酸鈉    20mg
含量測(cè)定    110816-200507    ?;氢c    20mg
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