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上海一研生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒的放大系統(tǒng)

時(shí)間:2018/2/8閱讀:1400
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抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒免疫測(cè)定自20世紀(jì)70年代初創(chuàng)立以來,由于其具有特異、靈敏、簡便、快速的特點(diǎn),現(xiàn)已在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域及臨床疾病的診療中得到了廣泛的應(yīng)用,相對(duì)于放射免疫測(cè)定(RIA)技術(shù)來說,EIA還有試劑半衰期長,對(duì)環(huán)境污染小,試驗(yàn)廢物易于處理等優(yōu)點(diǎn),但測(cè)定敏感性一般較RIA低,于是,為提高EIA的測(cè)定敏感性,出現(xiàn)了眾多的EIA測(cè)定放大系統(tǒng),使EIA的測(cè)定敏感性趕上甚或超過了RIA。
 
建立正IA測(cè)定放大系統(tǒng)的一般原則
 
    EIA本身是以酶[辣根過氧化物酶(HRP)、堿性磷酸酶(AP)等]作標(biāo)記物的,因此,EIA的測(cè)定放大始終是圍繞著標(biāo)記酶來作文章的,不外乎三種可能的方式:①增加標(biāo)記酶的量;②非顯色底物的應(yīng)用;③附加一個(gè)受標(biāo)記酶催化的反應(yīng)系統(tǒng)。
 
    一、增加標(biāo)記酶的量
    通過/親合素—酶或酶/抗酶復(fù)合物的間接方法,可以增加ELISA測(cè)定中zui后所測(cè)定的標(biāo)記酶的量。這種方法雖在一定程度上由于標(biāo)記酶的聚集增加了EIA的測(cè)定敏感性,但同時(shí)有增加非特異的背景顯色的可能。
 
    二、非顯色底物的應(yīng)用
    從酶的反應(yīng)底物著手,使用具有高測(cè)定敏感性的非顯色底物如熒光素或發(fā)光物,從而提高EIA的測(cè)定敏感性,這種方法的優(yōu)點(diǎn)是不需額外的步驟及試劑制備,缺點(diǎn)是需要特殊的測(cè)定儀器。
 
    三、附加一個(gè)受標(biāo)記酶催化的反應(yīng)系統(tǒng)
原始標(biāo)記酶催化附加一個(gè)反應(yīng)系統(tǒng),如酶底物反應(yīng)循環(huán)或酶級(jí)聯(lián)反應(yīng),從而抗Ⅲ抗體Elisa試劑盒達(dá)到反應(yīng)放大的目的。這種由數(shù)個(gè)催化反應(yīng)的耦聯(lián)而構(gòu)建的放大系統(tǒng),是酶放大的根本之所在,敏感性的提高來源于真正的信號(hào)放大,而不是簡單地將一個(gè)分子轉(zhuǎn)變?yōu)楦嗟囊子跍y(cè)定的分子。一個(gè)適用的酶放大系統(tǒng)的選擇除了要考慮生化因素外,zui為重要的是酶及其底物的穩(wěn)定性,并要易于獲得,因其對(duì)試驗(yàn)的準(zhǔn)確性和重復(fù)性有較大的影響。
培養(yǎng)基            進(jìn)口、國產(chǎn)    Glycine Medium    用于彎曲桿菌耐受性試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))    250
快速硫化氫試驗(yàn)瓊脂        進(jìn)口、國產(chǎn)    H2S Test Medium    用于彎曲桿菌的硫化氫試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))    250
DNA酶甲基綠瓊脂基礎(chǔ)       進(jìn)口、國產(chǎn)    Dnase Agar Base with Methyl Green    用于彎曲桿菌的DNA酶水解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))    100
馬尿酸鈉培養(yǎng)基    進(jìn)口、國產(chǎn)        用于彎曲桿菌的馬尿酸鈉水解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))    100
快速硫化氫(H2S)試驗(yàn)瓊脂    進(jìn)口、國產(chǎn)        用于彎曲桿菌的硫化氫試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))    250
波爾頓選擇性增菌肉湯    進(jìn)口、國產(chǎn)    Bolton Selective Enrichment broth    用于彎曲桿菌選擇性增菌培養(yǎng)(Merck方法)    250
CCDA基礎(chǔ)    進(jìn)口、國產(chǎn)    CCDA Base    用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(WHO方法)    250
CCDA添加劑    進(jìn)口、國產(chǎn)    CCDA Supplement    每支添加于200mlCCDA基礎(chǔ)中    2ml*10支
Campy-Cefex 瓊脂基礎(chǔ)    進(jìn)口、國產(chǎn)    Campy-Cefex Agar Base    用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(FDA方法)    250
Campy-Cefex 添加劑    進(jìn)口、國產(chǎn)    Campy-Cefex Supplement    每支添加于200ml Campy-Cefex 瓊脂基礎(chǔ)中    2ml*10
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