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中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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ELISA試劑盒的三條基本原理

時(shí)間：2019/4/24閱讀：1199
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         ELISA試劑盒因而含雜質(zhì)較多的抗原也可采用捕獲包被法,實(shí)驗(yàn)的特異性、敏感性均由此得以改進(jìn)，重復(fù)性亦佳。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是經(jīng)過(guò)物理吸附的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體外表的疏水基團(tuán)間的作用于?？蓪⒕郾揭蚁┌逑冉?jīng)紫外線照耀（例如30W紫外燈，75cm照耀12小時(shí)），以添加其吸附性能。例如，在查看抗DNA抗體時(shí)，需用DNA作為包被抗原，ELISA試劑盒而遍及的固相載體通常不能直接與核酸。換言之，包被便是抗原或抗體到固相載體外表的進(jìn)程。當(dāng)抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區(qū)域時(shí)，抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充沛暴露，在這種情況下，直接包被作用欠安，能夠采用直接的捕獲包被法，即先將對(duì)于該抗原的特異抗體作預(yù)包被，這以后經(jīng)過(guò)抗原。也可用親和素系統(tǒng)作直接包被，即用親和素先包被載體，然后參加化的DNA，這種包被辦法均勻、牢固，已擴(kuò)展應(yīng)用于各種抗原物質(zhì)的定量測(cè)定。
ELISA試劑盒的基本原理有三條：
（1）抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體外表，可能是蛋白和聚苯乙烯外表間的疏水性部分彼此吸附，并堅(jiān)持其免疫學(xué)活性；
（2）抗原或抗體可經(jīng)過(guò)共價(jià)鍵與酶銜接形成酶物，ELISA試劑盒而此種酶物仍能堅(jiān)持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；
（3）酶物與相應(yīng)抗原或抗體后，可根據(jù)參加底物的色彩反響來(lái)斷定是不是有免疫反響的存在，并且色彩反響的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的，因而，能夠按底物顯色的程度顯示實(shí)驗(yàn)成果。法是免疫診斷中的一項(xiàng)新技術(shù)，現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所導(dǎo)致的流行癥、寄生蟲(chóng)病及非流行癥等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測(cè)定，ELISA試劑盒根據(jù)現(xiàn)已使用的成果，以為法具有靈敏、特異、簡(jiǎn)略、快速、安穩(wěn)及易于自動(dòng)化操作等特色。不只適用于標(biāo)本的查看，并且由于一天以?xún)?nèi)能夠查看幾百乃至上千份標(biāo)本,因而，也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。

 

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