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上海一研生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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GSK Elisa Kit造成高值陰性

時(shí)間:2018-4-20閱讀:1227
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GSK Elisa Kit任何的診斷試劑離不開的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種制備。近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn)。
1.1當(dāng)標(biāo)本采集保存不當(dāng)產(chǎn)生溶血時(shí),紅細(xì)胞中的血紅蛋白釋放到血清中,血紅蛋白具有過氧化物酶的性質(zhì),其通過吸附或“PP效應(yīng)"(蛋白質(zhì)間相互吸附的現(xiàn)象)結(jié)合后,可催化A、B液顯色而造成假陽性1.2標(biāo)本采集保存不當(dāng)致細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng);標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過長導(dǎo)致血清IgG聚合,易使間接法的試驗(yàn)本底加深。因此,標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。
1.3反復(fù)凍融血清會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存做多次檢測(cè),宜少量分裝凍存。2、加樣
2.1如果 樣品稀釋液少加或血清多加,都會(huì)引起本底增高。對(duì)于間接法來說,受上述兩個(gè)因素影響更大。因?yàn)檠逯惺軝z的特異性IgG只*IgG中的一小部分。IgG的吸附性很強(qiáng),非特異性IgG可直接吸附到固相載體上,有時(shí)也可吸附到包被抗原的表面。這些非特異性的IgG均可以和酶標(biāo)二抗發(fā)生反應(yīng)而造成較高陰性本底或假陽性。如果加入的血清過多,高于規(guī)定的稀釋倍數(shù),極易造成高值陰性。反之,造成假陰性。
2.2  如果加入的酶結(jié)合物過多或加在較高的孔壁上或孔口,也會(huì)引起本底升高或假陽性。
2.3如果血液未開始凝固或凝固不*時(shí)就強(qiáng)行離心分離血清,此時(shí)的血清中仍留部分纖維蛋白原,在GSK Elisa Kit測(cè)定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果。
111703-200602    鑒別    20mg    芒柄花素
111705-200602    GC法含量測(cè)定    0.2ml    (-)-薄荷酮
111706-201004    含量測(cè)定    0.2ml    胡薄荷酮
111717-200501    含量測(cè)定    20mg    1,5-O-二咖啡??鼘幩?br />111724-        20mg    3,29-二苯甲酰基栝樓仁三醇
111728-201001    含量測(cè)定    20mg    柳穿魚葉苷
111742-200501    含量測(cè)定    20mg    當(dāng)藥苷
111743-200501    含量測(cè)定    1ml    正丁醇
111744-200501    含量測(cè)定    10mg    1-羥基-3,4,5-*氧基山酮
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