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Pepsin DRGelisa試劑盒說明書

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更新時間:2019-01-22 08:41:44瀏覽次數(shù):744次

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三、提供全程技術(shù)指導(dǎo)。

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Pepsin DRGelisa試劑盒說明書

Mouse Pepsin ELISA Kit

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小鼠(Pepsin)DRGelisa試劑盒 Mouse Pepsin ELISA Kit
Pepsin DRGelisa試劑盒說明書【實驗用途】Pepsin(), 是一種消化性蛋白酶,由胃部中的胃粘膜主細(xì)胞(gastric chief cell)所分泌,功能是將食物中的蛋白質(zhì)分解為小的肽片段。的前體被稱為原在對蛋白或多肽進(jìn)行剪切時,具有一定的氨基酸序列特異性。例如,它傾向于剪切氨基端或羧基端為芳香族氨基酸(如苯、和)或的肽鍵;]而如果往某一肽鍵氨基端數(shù)第三個氨基酸為堿性氨基酸(如賴氨酸、和)或者該肽鍵的氨基端為時,則不能有效地對此肽鍵進(jìn)行剪切。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)(biotin)標(biāo)記。樣品和標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
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操作流程:
(1)Pepsin DRGelisa試劑盒說明書待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
(6)洗板,同(4)。 
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。 
(9)洗板,同(4)。 
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
試劑盒組成及試劑配制 :
1.Pepsin DRGelisa試劑盒說明書 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
pcDNA6/myc-His C(pcDNA6mycHisC)  *

pcDNA6/TR(pcDNA6TR)(60908-1740)  *

pcDNA6/V5-His A(pcDNA6V5HisA)  *

pcDNA6/V5-His B(pcDNA6V5HisB)  *

pcDNA6/V5-His C(pcDNA6V5HisC)  *

pCDNATM6/Myc-His-A(pCDNATM6MycHisA)  *

pcDNAⅠ  *

pcDNAⅡ  *

pcDV1  *

pCE10  *

pCE30  *

pCE54  *
川木香(川木香)英文名稱:Kawa Kika (Sichuan woody)規(guī)格:2g保存:-20℃,避光

土木香英文名稱:Elecampane規(guī)格:0.5g保存:-20℃,避光

金蓮花英文名稱:Trollius chinensis規(guī)格:1g保存:-20℃,避光

山芝麻英文名稱:Mountain sesame規(guī)格:2.5g保存:-20℃,避光

地骨皮英文名稱:Cortex Lycii Radicis規(guī)格:1g保存:-20℃,避光

雞蛋花英文名稱:Egg flower規(guī)格:1.5g保存:-20℃,避光

芫花條英文名稱:Article genkwanin規(guī)格:1g保存:-20℃,避光

藏菖蒲英文名稱:Acorus calamus L.規(guī)格:2g保存:-20℃,避光

棉花根英文名稱:Cotton root規(guī)格:1.5g保存:-20℃,避光

英文名稱:Andrographis paniculata規(guī)格:0.5g保存:-20℃,避光

澤瀉英文名稱:Rhizoma alismatis規(guī)格:1g保存:-20℃,避光

阿魏英文名稱:Ferulic規(guī)格:0.5g保存:-20℃,避光
Pepsin DRGelisa試劑盒說明書大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA Kit   *

大鼠大內(nèi)皮素(Big ET)ELISA Kit   *

大鼠催乳素(PRL)ELISA Kit   *

大鼠釋放激素受體抗體(GNRHR-Ab)ELISA Kit   *

大鼠釋放激素受體(GnRHR)ELISA Kit   *

大鼠釋放激素(GnRH)ELISA Kit   *

大鼠促生長激素釋放激素(GRH)ELISA Kit   *

大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA Kit   *

大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)ELISA Kit   *

大鼠促卵泡素(FSH)ELISA Kit   *

 

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