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當(dāng)前位置:上海一研生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50次豬類圓線蟲LAMP試劑盒

豬類圓線蟲LAMP試劑盒

參  考  價面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號50次

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地上海市

更新時間:2021-03-03 09:47:17瀏覽次數(shù):501次

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豬類圓線蟲LAMP試劑盒上海一研生物相關(guān)產(chǎn)品:二氯酞菁錫(IV)Two tin phthalocyanine tin (IV):702.15 C32H16Cl2N8Sn:18253-54-8

五溴甲:486.62Five bromine toluene:87-83-2 C7H3Br5

間二甲酰:194.19Benzene two a:2760-98-7 C8H10N4O

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

參數(shù)規(guī)格:

產(chǎn)品名稱

豬類圓線蟲LAMP試劑盒

英文名稱

 Lamp kit for Strongyloides suis

規(guī)格

50次

儲存條件:
僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

Methylene blue:337.87 C16H20ClN3OS:122965-43-9

醋龍環(huán)氧Prednisolone acetate epoxy:400.46482 C23H28O6:38680-83-0

2--6-吡:2- amino -6- formaldehyde:548

牛磺膽鈉Sodium taurocholate:537.68C26H44NNaO7S·xH2O:145-42-6

二氯酞菁錫(IV)Two tin phthalocyanine tin (IV):702.15 C32H16Cl2N8Sn:18253-54-8

五溴甲:486.62Five bromine toluene:87-83-2 C7H3Br5

間二甲酰:194.19Benzene two a:2760-98-7 C8H10N4O2

無水硫鉀:110.3Anhydrous potassium sulphide:1312-73-8 K2S

DBD-CO-Hz:328.35DBD公司赫茲:179951-63-4 C11H16N6O4S

豬類圓線蟲LAMP試劑盒重組食蟹猴 XCL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

GADD45B 基因全長ORF克隆

大鼠 CD83 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

ERP72 / PDIA4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

大鼠 EHD3 基因全長ORF克隆

大鼠 IL2RB 基因全長ORF克隆

FGFR1 基因全長ORF克隆

CD2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)

EZH2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標(biāo)簽

小鼠 NTF3 基因全長ORF克隆

重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, Fc 標(biāo)簽)

甲型流感 H5N1 (禽流感) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配對抗體

 

 

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