產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Human VEGF121 Protein

產(chǎn)品中文名稱：重組人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子121（ VEGF121）

規(guī)格：10 μg/100 μg/1 mg

貨號(hào)：EY-01X8735
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

標(biāo)簽:無(wú)標(biāo)簽

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:人

序列:氨基酸序列來(lái)源于：人源VEGF121 (P15692) (Ala207-Arg327) 表達(dá)的蛋白片段。

活性:固定化的人源血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 121用量為1μg/ml (100 μl/well)，可與人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2結(jié)合，人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2的EC50為 156.5 ng/mL。

蛋白長(zhǎng)度：重組人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子121由121個(gè)氨基酸組成，預(yù)測(cè)分子量為14 KD。

純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測(cè)

采用 LAL動(dòng)?動(dòng)

背景

VEGF是一種有效的生長(zhǎng)和血管生成細(xì)胞因子。它刺激內(nèi)皮細(xì)胞增殖和存活，促進(jìn)血管生成和血管通透性。VEGF在血管化組織中表達(dá)，在正常和病理血管生成中發(fā)揮重要作用。

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

1.操作簡(jiǎn)便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無(wú)需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無(wú)放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來(lái)溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

CD133 造血干細(xì)胞抗原CD133 0.5mgCD133 造血干細(xì)胞抗原CD133

IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白

SERPINA7重組小鼠 SerpinA7 / TBG 蛋白 Protein

SERPINE1 Protein Rat 重組大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

DKKL1重組人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

豚鼠孕激素(progestogen)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： progestogen ELISA Kit

Human proteoglycan (PG) ELISA Kit 人蛋白聚糖(PG)檢測(cè)試劑盒

Monkeymaixmetalloproteinase11,MMP11ELISAKit基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBMP-4(MouseBonemorphogeneticprotein4)ELISAKit小鼠骨成型蛋白4

細(xì)菌鎂離子濃度化學(xué)比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

rabbitmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit兔子基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

水樣中離子（Hg2+）濃度測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/48樣

水樣中六價(jià)鉻離子（Cr6+）濃度測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/48樣

組織無(wú)機(jī)0含量測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/48樣

組織總0含量測(cè)試盒   可見(jiàn)分光光度法   50管/48樣

大鼠內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： LIPG ELISA Kit

Monkey ierleukin 6 (IL-6) ELISA Kit 猴白介素6(IL-6)檢測(cè)試劑盒

Ratcardioophln1,CT-1ELISAKit 大鼠心肌營(yíng)養(yǎng)素1(CT-1)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGL1(HumanGlucoseanspoer1)ELISAKit人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1

細(xì)胞分泌型堿性0酸酶活性熒光定量檢測(cè)試劑盒20次

RatStemCellFactorReceptor,SCFRELISAKit大鼠干細(xì)胞因子受體(SCFR)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子121（ VEGF121）SERPINA7重組小鼠 SerpinA7 / TBG 蛋白 Protein

CD133 造血干細(xì)胞抗原CD133 0.5mgCD133 造血干細(xì)胞抗原CD133

DKKL1重組人 DKKL1 / Soggy-1 / SGY-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IGFBP7 Protein Human 重組人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白

SERPINE1 Protein Rat 重組大鼠 SerpinE1 / PAI-1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過(guò)PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過(guò)RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過(guò)夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過(guò)夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。