產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Human Noggin Protein, His tag

產(chǎn)品中文名稱：重組人Noggin蛋白，His-標(biāo)簽（Noggin）

規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號(hào)：EY-01X8766
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢(shì):

序列:氨基酸序列來源于：人源Noggin (Q13253) (Gln28-Cys232) 表達(dá)的蛋白片段。

活性:Testing in Progress

蛋白長度：重組人Noggin由206個(gè)氨基酸組成，預(yù)測(cè)分子量為23.2 KD。

純度:> 98 % ，使用SDS-PAGE檢測(cè)

通過LAL法測(cè)定，每微克蛋白里內(nèi)毒素含量<0.1 EU。

產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無菌的20 mM Tris，50 mM NaCl，pH 8.0。

基因ID:9241

使用中注意事項(xiàng):開蓋使用前，請(qǐng)先離心。本產(chǎn)品為凍干粉，動(dòng)?動(dòng)

背景

The secreted polypeptide Noggin, encoded by the Noggin gene, binds and inactivates members of the transforming growth factor-beta (TGF-beta) superfamily signaling proteins, such as bone morphogenetic protein-4 (BMP4). By diffusing through extracellular matrices more efficiently than members of the TGF-beta superfamily, Noggin may have a principal role in creating morphogenic gradients. Noggin appears to have pleiotropic effect, both early in development as well as in later stages. It was originally isolated from Xenopus based on its ability to restore normal dorsal-ventral body axis in embryos that had been artificially ventralized by UV treatment. The results of the mouse knockout of Noggin suggest that it is involved in numerous developmental processes, such as neural tube fusion and joint formation. Recently, several dominant human Noggin mutations in unrelated families with proximal symphalangism (SYM1) and multiple synostoses syndrome (SYNS1) were identified; both SYM1 and SYNS1 have multiple joint fusion as their principal feature, and map to the same region (17q22) as Noggin. All Noggin mutations altered evolutionarily conserved amino acid residues. The amino acid sequence of human Noggin is highly homologous to that of Xenopus, rat and mouse.

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡便、快捷?？芍苯蛹尤氲綑z測(cè)平板。在96-孔板中檢測(cè)時(shí),無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。
公司正在出售的產(chǎn)品：

CD19(B-lymphocyte antigen CD19 0.5mgCD19(B-lymphocyte antigen CD19) CD19

CDK7 & CCNH & MNAT1 Protein Human 重組人 CDK7 & CCNH & MNAT1 Heterotrimer 蛋白

TNFRSF19重組小鼠 TNFRSF19 / TROY 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

SELP Protein Rat 重組大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白

TXNDC17重組人 TXNDC17 / TRP14 / TXNL5 蛋白 Protein

小鼠(VE)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat CrossLaps ELISA Kit (Cr) 大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)檢測(cè)試劑盒

Humansorbitoldehydrogenase,SDHELISAKit 人脫輕酶(SDH)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

ChickenIerleukin6,IL-6檢測(cè)試劑盒雞白介素6(IL-6)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細(xì)胞IL蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次

Mouseglucocoicoidreceptor,GRELISAKit小鼠糖皮質(zhì)類固醇受體(GR)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠細(xì)胞色素P450(mouse Cytochrome P450)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠C反應(yīng)蛋白(mouse CRP)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠CXC趨化因子受體3(mouse CXCR3)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠CXC趨化因子配體16(mouse CXCL16)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

大鼠骨形成蛋白6(BMP6)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： BMP6 ELISA Kit

People aminoterminal propeptide of type III procollagen (P III ) ELISA Kit 人Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)檢測(cè)試劑盒

RatAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit 大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforEMAIgA(Humanai-EndomysialAibodyIgA)ELISAKit人抗肌內(nèi)膜抗體IgA

細(xì)胞內(nèi)核酸氧化8-羥基鳥苷(8-OHG流式細(xì)胞分析試劑盒10次

RatIerleukin8,IL-8ELISAKit大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組人Noggin蛋白，His-標(biāo)簽（Noggin）TNFRSF19重組小鼠 TNFRSF19 / TROY 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

CD19(B-lymphocyte antigen CD19 0.5mgCD19(B-lymphocyte antigen CD19) CD19

TXNDC17重組人 TXNDC17 / TRP14 / TXNL5 蛋白 Protein

CDK7 & CCNH & MNAT1 Protein Human 重組人 CDK7 & CCNH & MNAT1 Heterotrimer 蛋白

SELP Protein Rat 重組大鼠 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對(duì)引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測(cè)序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對(duì)照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。