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總結(jié)ELISA試劑盒實驗中的失誤

時間：2016/5/26閱讀：880

　　.實驗人員應(yīng)掌握實驗室基本操作具備基本素質(zhì)和具有一定的實踐經(jīng)驗。可以熟練使用實驗儀器、器械，善于總結(jié)和分析問題，對于實驗中出現(xiàn)的意外情況能穩(wěn)重妥善解決。

　　2.在操作前必須仔細(xì)閱讀說明書，嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范操作，不同批號的試劑千萬不能混用。在反復(fù)試驗確定成立后方可改進(jìn)。

　　3.必須嚴(yán)格控制反應(yīng)時間，如果反應(yīng)時間過長，酶會失有可能造成假陰性。

　　4.評估試劑的實用性，試劑是否穩(wěn)定，對準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在使用試劑前，應(yīng)進(jìn)行陰、陽對照及樣品反復(fù)比照試驗，判定試劑符合要求后方可使用。

　　5.使用校對過的微量移液器可以排除自然誤差，移液器準(zhǔn)確與否對定量檢測尤為重要。

　　6.加樣不僅要做到快速也必須保證準(zhǔn)確。如若加樣不準(zhǔn)確，酶生成物的量不能確定直接影響顯色結(jié)果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關(guān)，所以加樣需慎重。如果加樣遲緩會出現(xiàn)誤差，如果試劑長時間暴露在外，尤其室溫過高時，保存期會縮短甚至失效。

　　7.嚴(yán)格掌握顯色時間，如若顯色時間過短加入終止液反應(yīng)終止后底物結(jié)合物的量過少，易出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時間后顯色，應(yīng)判為假陽性，這可能與試劑本身有關(guān)。加顯色劑后立即顯色，不可報陽性，這可能是本底顯色的結(jié)果。

　　8.洗滌一定要*，如果洗板不*，酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。另外需要注意洗滌液要新鮮，現(xiàn)用現(xiàn)配，陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象，也可能會出現(xiàn)假陽性。

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